A legfontosabb különbség az inszerciós és helyettesítő vektorok között az, hogy az inszerciós vektor képes mérsékelt hosszúságú idegen DNS beillesztésére, míg a helyettesítő vektor nagyobb hosszúságú idegen DNS befogadására.
A fágvektorok a klónozáshoz használt bakteriofágok. Kétféle fágvektor létezik; ezek inszerciós vektorok és helyettesítési vektorok. Ezenkívül minden fágvektor nem esszenciális génekből áll. Ezeket a géneket azonban el kell távolítani a fágokból, hogy elősegítsék az új idegen DNS beépülését.
Mi az a beszúrási vektor?
Először is, az inszerciós vektor a lambda klónozó vektorok legegyszerűbb formája. Valójában ez egy olyan típusú fágvektor, amelynek egyedi restrikciós helye van bevezetve a vektor genomjába, az opcionális DNS pozíciójába. Ezenkívül a fág DNS eltávolítás nélkül marad. A fág DNS eltávolításának elmulasztása lecsökkenti a vektorba klónozandó inszertek (idegen DNS) méretét. Ezenkívül ezek a vektorok hasznosak a cDNS klónozásában és expressziójában. A GT10, GT11 és Zap példák erre a vektorra.
01. ábra: Lambda fág
A beillesztési vektor egyetlen felismerési helyből áll. Ennek a vektornak az elsődleges feladata, hogy eukarióta mRNS-szekvenciákból származó cDNS-könyvtárakat fejlesszen ki. Ezenkívül csak 05-11 kb közötti hosszúságú idegen DNS-t képes befogadni. Ezenkívül egyedi hasítási hellyel rendelkezik az idegen DNS beépítéséhez.
Mik azok a helyettesítő vektorok?
A helyettesítő vektor vagy szubsztitúciós vektor egy fágvektor, amelyet a fág DNS egy középső „töltőfragmens” régiójának eltávolításából fejlesztettek ki. A kívánt idegen DNS inszert helyettesíti a fág DNS-t.
02. ábra: Cserevektor
A helyettesítő vektorok fontosak az olyan genomiális könyvtárak létrehozásában, mint az EMBL4 és a Charon40. Ezek a vektorok nagyobb hosszúságú, 08-24 kb hosszúságú idegen DNS-t képesek befogadni. A töltőrégió egy génből is áll, amely a fágvektort életképtelenné teszi egy bakteriális gazdaszervezetben.
Milyen hasonlóságok vannak a beillesztési és cserevektorok között?
- A beillesztési és helyettesítési vektorok fágvektorok.
- Mindkét vektor befogadja az idegen DNS-inszertet.
- Mindkettő hasznos a DNS-könyvtárak létrehozásában.
Mi a különbség a beillesztési és cserevektorok között?
Beszúrás vs cserevektorok |
|
| Az inszerciós vektor a fágvektor egy olyan típusa, amelynek restrikciós helye van beépítve a fággenomba az opcionális DNS helyére. | A helyettesítő vektor a fágvektor egy olyan típusa, amelyet a fág DNS egy középső „töltőfragmens” régiójának eltávolításából fejlesztettek ki |
| Beszúrt töredékek mérete | |
| 05-11 kb hosszúság | 08-24 kb hosszúság |
| Filler Fragment | |
| Nincs töltőanyag-részlet | A kitöltő töredékét egy idegen betét helyettesíti |
| Funkció | |
| Fontos cDNS-könyvtárak létrehozásához | Fontos a genomkönyvtárak létrehozásához |
| Példák | |
| GT10, GT11 és Zap a példák | EMBL4 és Charon40 a példák |
| Cleavage Site | |
| Egyedülálló hasítási hely van jelen | A hasítási hely olyan géneket tartalmaz, amelyek nem nélkülözhetetlenek a litikus ciklushoz |
Összefoglaló – Beszúrás vs csere vektorok
Mind az inszerciós, mind a helyettesítő vektorok a fágvektorok két típusa. Mindkét vektornak vannak restrikciós helyei, amelyek megkönnyítik az új idegen DNS-inszertek befogadását. Az inszerciós vektorok fontosak a cDNS-könyvtárak létrehozásában, míg a helyettesítő vektorok a genomiális könyvtárak létrehozásában. Ezenkívül az inszerciós vektorok mérsékelt hosszúságú DNS-inszerteket tartalmaznak. De a helyettesítő vektorok nagyobb hosszúságú idegen DNS-inszertek befogadására képesek. Összességében ez a legfontosabb különbség a beillesztési és helyettesítési vektorok között.
