A legfontosabb különbség az Elisa és az Elispot között, hogy az Elisa egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati eljárás, amely meghatározza a szekretált jelzőfehérjék összkoncentrációját, míg az Elispot egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati eljárás, amely az egyes citokin-kiválasztó sejteket detektálja.
Az Elisa és az Elispot két enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati módszer, amelyet széles körben használnak az orvostudományban, a növénypatológiában, a biotechnológiában és a különböző gyógyszeriparban. Ezekben a technikákban egy fehérjeanalitot egy ellene irányuló antitest mutat ki. Az Elisa a legnépszerűbb enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati módszer, amelyet laboratóriumokban használnak. Másrészt az Elispot egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat, amelyet nem az Elisa helyett, hanem az Elisa mellett alkalmaznak laboratóriumokban.
Mi az Elisa Assay?
Az Elisa egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat, amely meghatározza a szekretált jelátviteli fehérjék teljes koncentrációját. Ez egy széles körben használt analitikai biokémiai vizsgálat, amelyet először Engvall és Perlmann írtak le 1971-ben. Ez a technika szilárd fázisú enzim-immunoassay-t használ egy specifikus fehérje jelenlétének kimutatására egy folyékony mintában, e specifikus fehérje elleni antitestek segítségével. Ez a vizsgálat az orvostudományban, a növénypatológiában és a biotechnológiában általánosan használt diagnosztikai eszköz.
ELISA-teszt mechanizmusa
Az ELISA teszt legtöbbjében ismeretlen mennyiségű antigént rögzítenek szilárd hordozóra (mikroliteres lemezre) az elején. Ezután a megfelelő elsődleges antitestet felvisszük a szilárd hordozófelületre. Ez az antitest komplexet képez az antigénnel (antigén-antitest komplex). Az antigénhez kötött primer antitest egy másodlagos antitesttel mutatható ki, amely biokonjugáció révén egy enzimhez kapcsolódik. Az Elisa teszt utolsó lépésében az enzim szubsztrátját tartalmazó anyagot adunk hozzá. Ha az elsődleges antitest megfelelően kötődik az antigénhez, akkor a szubsztrát kimutatható színváltozást idéz elő. Végső soron ez meghatározza a mintában lévő antigén mennyiségét.
01. ábra: Különböző típusú Elisa
Továbbá az Elisával kapcsolatban különböző megközelítések léteznek, mint például a közvetlen Elisa és a közvetett Elisa. Jelenleg különféle Elisa teszteket használnak az emberi kórokozók kimutatására, mint például a Mycobacterium tuberculosis, a rotavírus, a hepatitis B vírus, a hepatitis C vírus, az enterotoxint termelő E.coli, a HIV és a SARS-CoV-2.
Mi az Elispot Assay?
Az Elispot egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati eljárás, amely kimutatja az egyes citokin-kiválasztó sejteket. Cecil Czerkinsky 1983-ban írta le először az ELISpotot. Ez egy olyan típusú vizsgálat, amely egyetlen sejt citokinszekréciójának gyakoriságának kvantitatív mérésére összpontosít. Olyan technikának is besorolják, amely antitesteket használ egy biológiai vagy kémiai fehérjeanalit kimutatására. A Fluorospot assay az Elispot assay egy változata, amely fluoreszcenciát használ több analit (több titkos fehérje) elemzésére.
Az Elispot teszt mechanizmusa
Ennél a mechanizmusnál a citokinspecifikus monoklonális antitesteket először a mikroliteres lemezek üregeibe adják. Ezután a kívánt megfigyelt sejteket hozzáadjuk a lyukakba. Később a sejteket inkubálják. A sejtinkubáció során a sejtek reagálhatnak bármilyen ingerre, és citokint választanak ki. Az inkubált sejtek által kiválasztott citokinek az antitestekhez kötődnek, mivel a sejteket citokinspecifikus monoklonális antitestek veszik körül.
02. ábra: Elispot Assay
E citokin-specifikus monoklonális antitestek kimutatásához biotinilált specifikus detektáló antitesteket adnak a mérőhelyhez. A biotinilált specifikus detektáló antitestek befogják a citokinspecifikus monoklonális antitesteket a lyukakban. Ezen túlmenően sztreptavidin-enzim konjugátumokat adnak a lyukakba annak érdekében, hogy kötődjenek a detektáló antitestekhez. Az utolsó lépésben speciális szubsztrátokat adnak a lyukakba. Az enzimkonjugátumok és szubsztrátok reakciói külön foltokat hoznak létre a lyukakban. Ezeket a különálló pontokat egy automata ELISpot olvasó olvassa be. Végső soron ez tovább fogja számítani a citokin szekréció gyakoriságát.
Mi a hasonlóság Elisa és Elispot között?
- Mindkettő enzimhez kötött immunszorbens teszt.
- Mindkét vizsgálat specifikus fehérjeanalitokat mutat ki.
- Ezek a vizsgálatok specifikus antitesteket használnak a fehérjeanalitok azonosítására.
- Mindkét vizsgálat enzimeket és szubsztrátokat használ.
- Diagnosztikai eszközként használják az orvosi laboratóriumokban.
Mi a különbség az Elisa és az Elispot között?
Az Elisa egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat, amely meghatározza a szekretált jelátviteli fehérjék teljes koncentrációját. Másrészt az Elispot egy enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat, amely az egyes citokin-szekréciós sejteket méri. Tehát ez a legfontosabb különbség az Elisa és az Elispot között. Ezenkívül az Elisa tesztben az antigént először a mikroliteres üregekben rögzítik. Ezzel szemben az Elispot tesztben az antitestet először a mikroliteres üregekben rögzítik. Tehát ez egy másik különbség az Elisa és az Elispot között.
Az alábbi infografika az Elisa és az Elispot közötti különbség részletes elemzését mutatja be táblázatos formában.
Összefoglaló – Elisa vs Elispot
Az Elisa és az Elispot két enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati módszer, amelyeket széles körben használnak az orvostudományban, a növénypatológiában, a biotechnológiában és a különböző gyógyszeriparban. Az Elisa a mérendő ligandum elleni antitestek segítségével detektálja a ligandum (fehérje) jelenlétét folyékony mintában. Az Elispot assay egy széles körben használt módszer az immunválaszok monitorozására. Antitestek segítségével detektálja az egyes citokint szekretáló sejteket. Ez egy immunoassay és bioassay technika is. Így ez az Elisa és az Elispot közötti különbség összefoglalása.
