A legfontosabb különbség a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között az, hogy a kompetitív ELISA gátló antigént használ, míg a nem kompetitív ELISA nem használ gátló antigént a vizsgálathoz.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) egy immunológiai vizsgálat, amely különféle célpontokat, például antitesteket, antigéneket, fehérjéket és glikoproteineket detektál. Ez egy gyors és egyszerű módszer. Ezért gyakrabban használják kutatási és diagnosztikai célokra. Az ELISA magában foglalja az enzimek használatát, valamint az antitestek és antigének specifikus kötését. A reakciók végbemenetele alapján négyféle ELISA létezik: közvetlen ELISA, indirekt ELISA, szendvics ELISA és gátlásos ELISA. A közvetlen, a közvetett és a szendvics ELISA a nem kompetitív ELISA típusai, míg a gátlásos ELISA a komplett ELISA típusa. Ennek a cikknek a fő célja a kompetitív és nem kompetitív ELISA közötti különbség megvitatása.
Mi az a kompetitív ELISA?
A kompetitív ELISA a jel interferencia kimutatása révén méri a mintában lévő antigénkoncentrációt. Itt a vizsgálat inhibitor antigént használ. Ezért ez egyfajta gátlási ELISA. Az eljárás során a mintában jelenlévő antigének versengenek a kiválasztott referencia antigénnel a jelölt antitest meghatározott mennyiségéhez való kötődésért. Ezenkívül ez az eljárás a minta inkubálásával kezdődik, a jelölt antitest feleslegével. Ezenkívül a referencia antigént előzetesen be kell vonni egy többlyukú vizsgálati lemezre. Ezután a mintakeveréket hozzá kell adni a referencia antigént tartalmazó vizsgálati lemezhez. A szabad antitestek a mintában lévő antigén mennyiségétől függően kötődnek a referencia antigénhez. Ennélfogva, ha több mintaantigén van jelen, kevesebb referencia antigén kerül kimutatásra. Így gyengébb jelet hoz létre.
01. ábra: ELISA
Ezzel szemben, ha a minta kevesebb antigént tartalmaz, egyre több referencia antigén foglalja el az antitesteket, és erős jelet ad. Mivel a kompetitív ELISA erősebb jelet ad, ha a minta kevés antigént tartalmaz, a kompetitív ELISA nagyon érzékeny vizsgálati módszer, még kis számú antigént tartalmazó minták esetén is.
Egyes kompetitív ELISA készletekben jelölt antigént használnak jelölt antitest helyett. Itt a jelölt antigén és a minta antigén verseng az elsődleges antitesthez való kötődésért. Hasonlóképpen, ha a mintában alacsony az antigén mennyisége, az antitestekhez kötődő jelölt antigén mennyisége magasabb lesz, és erősebb jelet hoz létre.
Mi az a nem kompetitív ELISA?
Az ELISA négy típusa közül három típus a nem kompetitív ELISA. Ezek direkt ELISA, indirekt ELISA és szendvics ELISA. Mindhárom formátum az ELISA közös elve szerint működik, módszereikben némi eltéréssel.
A közvetlen ELISA enzimmel jelölt elsődleges antitestet használ. Ezért nincs szükség másodlagos antitestre. Ezért a közvetlen ELISA gyorsabb, mint más típusú ELISA. Az elsődleges antitest közvetlenül kötődik a lemezen lévő immobilizált célantigénhez. Ennélfogva az enzim-szubsztrát reakció megy végbe, látható jelet produkálva.
02. ábra: Szendvics ELISA
A közvetlen ELISA-val ellentétben az indirekt ELISA egy jelöletlen elsődleges antitestet és egy enzimmel jelölt másodlagos antitestet használ. Miután az elsődleges antitest kötődik az immobilizált antigénhez, a másodlagos antitest kötődik az elsődleges antitesthez. A másodlagos antitestben lévő enzim reagál az antigénnel, és látható jelet ad. A szendvics ELISA eltér mind a közvetlen, mind a közvetett ELISA-tól. Itt az antitest immobilizálva van a vizsgálati lemez falához.
Mi a hasonlóság a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között?
- A kompetitív és nem kompetitív ELISA kétféle immunszorbens vizsgálati technika.
- Nagyon rugalmas és érzékeny technikák.
- Továbbá mind a kompetitív, mind a nem kompetitív ELISA enzimhez kötött immunoassay.
- Ezenkívül mindkét módszer jelet generál egy enzim-szubsztrát reakció miatt.
Mi a különbség a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között?
A kompetitív ELISA az ELISA egy olyan típusa, amely az analit antigén és a jelölt antigén közötti befejeződésen alapul, korlátozott mennyiségű specifikus antitest esetében. Másrészt a nem kompetitív ELISA-ban nincs ilyen versengés a kérdéses antigén és a referenciaantigén között. Így ez a legfontosabb különbség a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között. Hasonlóképpen, a kompetitív ELISA egy gátló ELISA, míg a nem kompetitív ELISA nem egy gátlási ELISA. Tehát ez is különbség a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között.
Sőt, a kompetitív ELISA alkalmasabb kis mennyiségű, érdeklődésre számot tartó antigén mérésére. Ez egy érzékeny módszer. Másrészt a nem kompetitív ELISA nem függ a mintában jelenlévő antigének számától. Ezért ez is különbség a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között.
Az alábbi infografika elmagyarázza a kompetitív és a nem kompetitív ELISA közötti különbséget.
Összefoglaló – Versenyképes és nem kompetitív ELISA
A kompetitív és nem kompetitív ELISA az ELISA vagy az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatok két fő típusa. Összefoglalva a kompetitív és nem kompetitív ELISA közötti különbséget, a kompetitív ELISA a kérdéses antigén és a referencia antigén közötti versengésre támaszkodik a korlátozott mennyiségű antitesttel szemben. Ezért a kompetitív ELISA-t gátlásos ELISA-nak is nevezik. Másrészt a nem kompetitív ELISA nem támaszkodik a célantigének és a referencia antigének közötti versengésre. Feleslegben használ jelölt specifikus antitestet a kérdéses analit felé. Így ez a legfontosabb különbség a kompetitív és a nem kompetitív ELISA között. A közvetlen ELISA, a közvetett ELISA és a szendvics ELISA a nem kompetitív ELISA három fő típusa.
