A fő különbség a CLIA és az ECLIA között az, hogy a CLIA kémiai módszert használ a kemilumineszcencia generálására, míg az ECLIA elektrokémiai módszert használ a kemilumineszcencia jelek generálására az immunoassay technikában.
Az immunoassay-t széles körben használják betegségekkel vagy fertőzésekkel kapcsolatos fehérjék azonosítására és mennyiségi meghatározására. Ezért elsősorban az antitest-antigén kötődés koncepciójára támaszkodnak. Sokféle immunoassay létezik, és a kemilumineszcens immunoassay az egyik ilyen feltörekvő fejlesztési technika. A CLIA és az ECLIA is kemilumineszcens indikátorokat használ.
Mi az a CLIA?
Kemilumineszcens immunoassay (CLIA) az immunoassay egy olyan típusa, amely lumineszcens molekulát használ a kimutatáshoz. A molekula által kibocsátott lumineszcenciát a spektrofotométer érzékeli, általában 300-800 nm közötti hullámhosszon. A kemilumineszcencia az atomok gerjesztését okozza, és a technika az exergonikus kémiai reakciókat azonosítja a legmegfelelőbb energiaforrásként a gerjesztés előállítására.
A CLIA technika két fő módszerrel valósul meg: a közvetlen CLIA technika és a közvetett CLIA technika. A direkt CLIA technika direkt luminofor markereket használ, amelyek a célponthoz kötődnek, míg az indirekt CLIA módszer enzimatikus markereket használ. A direkt luminofor markerek közé tartoznak az acidum- és ruténium-észterek, míg a közvetett markerek közé tartozik az alkalikus foszfatáz adamantil-1,2-dioxetán-aril-foszfát (AMPPD) szubsztráttal és a torma-peroxidáz luminollal vagy származékaival szubsztrátként.
01. ábra: Kemilumineszcencia
A CLIA fő előnyei a funkciók széles dinamikus tartománya, a jeltovábbítás nagy intenzitása, a háttérinterferencia hiánya, a nagy specifitás, a gyorsaság, a stabilitás és a különböző vizsgálati protokollokkal való kompatibilitás. Ezzel szemben a magas költségük, valamint az antigén-detektáló és tesztpanelekkel kapcsolatos korlátok a CLIA hátrányai.
Mi az az ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) az immunoassay fejlesztésének új technikája, amely az elektrokemilumineszcencia fogalmát használja. Az elektrolumineszcencia fogalmában az intermedierek elektrokémiai úton keletkeznek. Ezek az elektronikus úton előállított intermedierek aztán gerjesztett állapotba kerülnek, és fénykibocsátást eredményeznek. Az a hullámhossz, amelyben a fényt kibocsátják, megfelel az energiarésnek. A kemilumineszcenciát tehát az elektródán elektrokémiai úton előállított egy vagy több reaktáns hoz létre.
Az ECLIA egy hasznos analitikai alkalmazás, nagy érzékenységgel és specifitással. Főleg különböző kóros és egészségügyi állapotokhoz kapcsolódó fehérjék azonosítására használják. Legfontosabb előnyei közé tartozik a szélesebb dinamikatartomány, a sokoldalúság, az elektródapotenciálok alkalmazásával történő térbeli és időbeli szabályozás, a nagy érzékenység a pikomoláris tartományokig. Azonban az a tény, hogy szakszerű kezelést igényel, és a kapcsolódó magas költségek, a hátrányai.
Mi a hasonlóság a CLIA és az ECLIA között?
- Mindkét technika az antigén-antitest kötődés koncepcióján alapul.
- Sőt, mindkettőt főként a fehérje mennyiségi meghatározásán alapuló betegségek diagnosztizálására használják.
- Mindkettő érzékeny és specifikus kit-módszer.
- A kimutatáshoz a kemilumineszcencia fogalmát használják.
- Automatizálhatók.
- Mindkettőhöz spektrofotométer szükséges a detektáláshoz.
- Mindkettő széles dinamikatartománnyal rendelkezik.
- Ezek költséges technikák.
Mi a különbség a CLIA és az ECLIA között?
A CLIA egy immunoassay technika, amely a kemilumineszcencia elméletét használja, míg az ECLIA egy olyan immunvizsgálati technika, amely az elektrokémia elméletét és a kemilumineszcenciát használja. Tehát ez a legfontosabb különbség a CLIA és az ECLIA között. Ezért a CLIA olyan kémiai reakciókat alkalmaz, amelyek kemilumineszcens jelek kialakulásához vezetnek, míg az ECLIA elektrokémiai reakciókat, amelyek kemilumineszcens jelek kialakulásához vezetnek.
A CLIA és az ECLIA közötti különbséget bemutató alábbi infografika több összehasonlítást mutat a két technika között.
Összefoglaló – CLIA kontra ECLIA
A A CLIA és az ECLIA egyaránt fontos szerepet játszik a betegségek diagnosztizálásában. Ezek az antitest-antigén kötődés koncepcióján alapuló fejlett immundiagnosztikai módszerek. A legfontosabb különbség a CLIA és az ECLIA között a kemilumineszcencia generálásának módszere. Míg a CLIA kémiai reakciókat használ a kemilumineszcencia létrehozására az antitest-antigén kötődését követően, addig az ECLIA elektrokémiai reakciókat használ a kemilumineszcencia generálására. Azonban mindkét technika gyors és specifikus.
