Kiemelt különbség – egyrétegű és felfüggesztett kultúra
A szövettenyésztés olyan módszer, amelyet a szervezettől elválasztott és különböző tápközegekben tenyésztett sejtek növekedésének indukálására használnak. A szövettenyésztésben a táptalaj fontos szerepet játszik. A sejtek fiziológiai és kémiai jellemzőitől függően különböző sejtek különböző tápközegben növekednek. Az egyrétegű tenyészet és a szuszpenziós kultúra két fő tenyészettípus, amelyeket a szövettenyésztési folyamat során használnak. Az egyrétegű tenyészet egy lehorgonyzástól függő tenyészet, amelyben a sejt növekszik, miközben egy szubsztráthoz kapcsolódik, a szuszpenziós tenyészet pedig egy lehorgonyzástól független tenyészet, ahol sejtaggregátumokat használnak sejttenyészetek létrehozására folyékony tápközegben. Ez a legfontosabb különbség az egyrétegű kultúra és a szuszpenziós kultúra között.
Mi az egyrétegű kultúra?
Az egyrétegű tenyészet olyan tenyészettípus, amelyben a sejteket egyetlen rétegben tenyésztik a tápközeget tartalmazó lombikon vagy Petri-csészén. Az egyrétegű kultúrát adherens kultúrának vagy lehorgonyzásfüggő kultúrának is nevezik. Az adherens vagy horgonyzástól függő tenyészetre való utalás oka az, hogy ezeknek a sejteknek szubsztrátra van szükségük a növekedésük során történő rögzítéshez. Megtapadnak a szubsztrátot tartalmazó sejttenyészethez.
A táptalajban használt szubsztrátokat használat előtt fel kell tölteni. Ezek a töltött szubsztrátok elősegítik a sejt-sejt kölcsönhatásokat. Elektromos ionkisülés, kétértékű kation bevonatok és gamma-sugárzás azok a források, amelyeket ezeknek a szubsztrátumoknak a töltésére használnak. Az egyrétegű tenyésztő tápközegben, miután a sejteket beoltották, a növekedést a kontaktgátlásnak nevezett eljárással szabályozzák. Az érintkezésgátlás során a sejtnövekedés leáll, hogy megállítsa a normál sejtek burjánzását, amint azok egyrétegű réteget képeznek a felülethez.
01. ábra: ragaszkodó kultúra
Azokat a sejteket, amelyek más szubsztrátoktól függenek a rögzítésükhöz, tapadó sejteknek nevezzük. Ezek a tapadó sejtek gyakran szervszövetekből, például veséből stb. származnak. Ezek a sejtek mozdulatlanok, és jellemzően a kötőszövethez kapcsolódnak. Ezért ezeket az alapvető növekedési faktorokat biztosítani kell, amikor ezeket a sejteket tápközegen tenyésztik. Az egyrétegű tenyésztés jelentősége abban rejlik, hogy utánozza az eredeti természetes körülményeket a sejt megfelelő megtelepedéséhez.
Mi az a felfüggesztési kultúra?
A szuszpenziós tenyészet úgy definiálható, mint egy olyan tenyészettípus, ahol a sejtek kis aggregátumai vagy egyes sejtek szaporodnak folyékony közegben, amelyet folyamatosan kevernek. Más szavakkal, a szuszpenziós tenyészetet sejtszuszpenziós tenyészet sejttenyészetének is nevezik. Ez a tenyészet segíti egysejtes tenyészetek létrehozását, amelyek hasznosíthatók a növényi sejtek vizsgálata során, tekintettel azok eltérő potenciáljára és tulajdonságaira. Az ezzel kapcsolatos kutatások felhasználhatók a sejtek közötti kölcsönhatások megértésére és azok hatásaira, ha többsejtű szervezetekről van szó.
A kezdeti növényfejlődés során kallusz képződik, amely differenciálatlan sejtek tömege. Ez a növekedési szint akadályozza a sejtes események azonosítását a növény növekedési és fejlődési szakaszában. Ennek a helyzetnek a kiküszöbölésére szuszpenziós tenyészetet vezettünk be, mivel ez kiváló táptalajt biztosított a kalluszból nyert kis sejtes aggregátumokból egysejtes tenyészetek létrehozásához. Ezt a különböző morfológiai és biokémiai szempontok tanulmányozására használták fel a növény fejlődésének kezdeti szakaszában.
02. ábra: Felfüggesztési kultúra
Az ideális sejttenyészet előállítása során a tipikus módszer az, hogy egy morzsalékos kallusztömeget mozgatott folyékony közegbe visznek át, ahol a massza megtörik és könnyen szétoszlik. Ezt követően a nagy kalluszokat kiszűrik, megtartva a kissejtes aggregátumok és egysejtűek. Ezután ezeket a sejteket egy másik tápközegbe visszük át. Az aktívan növekvő sejteket két-három hét után nyerjük.
Mi a hasonlóság az egyrétegű és a felfüggesztett kultúra között?
- Mind az egyrétegű, mind a szuszpenziós tenyészet kétféle sejttenyészet, amelyet a sejtek létrehozására használnak fel
- Mind az egyrétegű, mind a szuszpenziós tenyészeteket megfelelő táptalajokon tenyésztjük.
- Mind az egyrétegű, mind a szuszpenziós tenyészeteket gyakran használják a szövettenyészetben.
Mi a különbség az egyrétegű és a felfüggesztett kultúra között?
Egyrétegű vs felfüggesztési kultúra |
|
| Az egyrétegű tenyészet egy lehorgonyzástól függő tenyészet, amelyben a sejteket szubsztráthoz kapcsolva szaporítják. | A szuszpenziós tenyészet egy lehorgonyzástól független tenyészet, ahol kis sejtaggregátumok vagy egyes sejtek szaporodása megy végbe kevert folyékony közegben szuszpendálva. |
| Követelmények | |
| Az egyrétegű tenyészethez szövettenyésztéssel kezelt érre van szükség, időszakos passzázssal. | Szuszpenziós tenyésztést lehet elérni nem szövettenyésztéssel kezelt erekkel. |
| Növekedési korlátozások | |
| Az egyrétegű tenyészet növekedését a hozamot közvetlenül befolyásoló felület korlátozza. | A szuszpenziós tenyészet növekedésének korlátozása a tápközegben lévő sejtek koncentrációja miatt következik be. |
| Sejtdisszociáció | |
| A sejtek disszociációja mechanikusan vagy enzimatikusan megy végbe az egyrétegű tenyészetben. | Szuszpenziós tenyészet nem igényel enzimek és mechanikai eszközök segítségét a sejtdisszociációhoz. |
| Cell vizualizáció | |
| Az egyrétegű tenyésztés lehetővé teszi a sejtek egyszerű megjelenítését. | Nehezebb megnézni a sejteket a szuszpenziós tenyészetekben. |
| Funkció | |
| Az egyrétegű tenyészetet a citológia, a kutatás és a folyamatos termékgyűjtés területén használják. | A szuszpenziós tenyészetet fehérjék tömeges előállítására, kutatási vizsgálatokra és tételes betakarításra használják. |
Összefoglaló – Egyrétegű vs felfüggesztési kultúra
Az egyrétegű tenyészet és a szuszpenziós kultúra a szövettenyésztésben használt két fő tenyészet. Az egyrétegű kultúra lehorgonyzásfüggő kultúra. A sejteket ebben a tenyészetben növesztjük, ahol a tenyészetben jelenlévő szubsztráthoz kapcsolódnak. A szubsztrátumokat használat előtt különböző források, például kétértékű bevonatok és ionkisülő bevonásával töltik fel. A szuszpenziós tenyészetek a rögzítéstől független tenyészetek, ahol a sejtek a rögzítéshez szükséges szubsztrát segítsége nélkül növekednek. Ez a tenyészet segíti egysejtes tenyészetek létrehozását, amelyek hasznosíthatók a növényi sejtek vizsgálata során, tekintettel azok eltérő potenciáljára és tulajdonságaira. Ez a különbség az egyrétegű tenyészet és a szuszpenziós tenyészet között.
