Fő különbség – Gram-festés vs saválló
A baktériumok nagyon kicsi mikroorganizmusok. Átlátszóak, észlelésük élő és szennyeződésmentes körülmények között nehézkes. Így különféle festési módszereket dolgoznak ki a baktériumok kimutatásának megkönnyítésére. A festési technikáknak három fő típusa van: egyszerű festés, differenciálfestés és szerkezeti festés. A differenciálfestés olyan technika, amely egynél több festést használ a baktériumok megkülönböztetésére. A Gram-festés és a saválló festés a legismertebb a differenciálfesték. A Gram-festés egy differenciális festési technika, amely a baktériumokat két csoportra osztja, amelyek Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok néven ismertek. A saválló festés egy differenciálfesték, amelyet a saválló szervezetek, például a Mycobacterium azonosítására használnak a nem saválló szervezetektől. Ez a legfontosabb különbség a Gram-festés és az Acid Fast festés között.
Mi az a Gram Stain?
A Gram-festés fontos differenciálfestési technika, amelyet a mikrobiológiában a baktériumok azonosítására használnak. Ezt a technikát Hans Christian Gram dán bakteriológus vezette be 1884-ben. A Gram-festés a baktériumokat két nagy csoportba sorolja, ezek Gram-pozitív és Gram-negatívak, amelyek nagyon fontosak a baktériumok osztályozásában és azonosításában. A mikrobiológusok vizsgálataik során a baktériumok jellemzésének kezdeti lépéseként Gram-festést végeznek.
A baktériumokat a sejtfaluk különbségei alapján csoportosítják. A Gram-pozitív baktériumok vastag peptidoglikán rétegből állnak a sejtfalukban, míg a Gram-negatív baktériumok vékony peptidoglikán rétegből állnak a sejtfalukban. A grammos festés eredménye a sejtfal peptidoglikán rétegének vastagságában mutatkozó különbségen alapul.
A grammos festést négy különböző reagenssel végezzük, nevezetesen; elsődleges folt, maró, színtelenítő és ellenfolt. A kristályibolya és a szafranin elsődleges és ellenfestékként, míg a gramm jód és a 95%-os alkohol maróanyagként és színtelenítőként használatos. A grammos festés alapvető lépései a következők:
- A bakteriális kenetet tiszta üveglemezen készítjük, hővel rögzítjük és lehűtjük.
- A kenetet 1-2 percig kristályibolyával árasztják el.
- A kenetet lassan folyó csapvízzel öblítik le, hogy eltávolítsák a felesleges foltokat.
- gramm jódot viszünk fel a kenetre 1 percig.
- A kenetet lassan folyó csapvízzel öblítik le
- A kenetet 95%-os alkohollal mossák 2–5 másodpercig, majd lassan folyó csapvízzel öblítik le.
- A kenet 1 percig szafraninnal ellenfestett
- A kenetet lassan folyó csapvízzel leöblítjük, megszárítjuk és mikroszkóp alatt megfigyeljük.
A Gram-festés végén a Gram-negatív baktériumok rózsaszín, míg a Gram-pozitív baktériumok lila színben lesznek megfigyelhetők.
01. ábra: Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok
A grammos festődés eredményét a sejtfalukban lévő peptidoglikán réteg vastagsága határozza meg. A színtelenítési lépés során az elsődleges folt és a maróanyag könnyen eltávolítható a gram-negatív baktériumokról, és színtelenné válik, mivel vékony peptidoglikán réteggel rendelkeznek. Az elsődleges folt a gram-pozitív baktériumokban megmarad, mivel vastag peptidoglikán réteggel rendelkeznek. Az ellenfestés nem lesz hatékony a gram-pozitív baktériumok esetében, mivel az elsődleges folt megmarad. Így a gram-pozitív baktériumok elsődleges foltszínben, azaz lila színben lesznek láthatóak. Az ellenfolt megfesti a Gram-negatív baktériumokat, és ezek a szafranin színével lesznek láthatóak. Ezért a baktériumokat könnyű két csoportba sorolni grammos festés alapján, és értékes a baktériumok megkülönböztetésében és azonosításában.
Mi az a saválló?
A savállóság bizonyos baktériumok fizikai tulajdonsága, különösen a festési eljárások során a savakkal szembeni elszíneződéssel szembeni ellenállásuk. Miután megfestették, ezek a szervezetek ellenállnak a sok festési protokollban szokásos híg sav és/vagy etanol alapú színtelenítési eljárásoknak. Így a „savgyors” elnevezést ezek a szervezetek kapják. Ez a tulajdonság annak köszönhető, hogy a sejtfalukban nagy mennyiségű viaszos anyag (mikolsav) található. Ez a teszt kritikus a Mycobacterium tuberculosis azonosításához.
2. ábra: Saválló mikobaktériumok
Ezt a saválló festést Paul Ehrlich fejlesztette ki 1882-ben. Ehrlich saválló technikáját Ziehl-Neelsen módosította, és ma már gyakrabban használják. A saválló festési eljárás három különböző reagenst tartalmaz. A karbol fuschint használják elsődleges foltként. Színtelenítő szerként savas alkoholt használnak. A metilénkéket használják ellenfoltként. A festési eljárás a következőképpen történik.
- Az elsődleges festést (karbol-fukszin) a tárgylemezen lévő rögzített mintára visszük fel (minden sejt vörös színű lesz).
- A tárgylemezt 5 perces gőzöléssel melegítjük, ami a foltokat megfelelően a cellákba vezeti.
- Ezután hozzáadjuk a színtelenítő oldatot (ez eltávolítja a vörös festéket minden sejtből, kivéve a saválló baktériumokat).
- Metilénkéket adunk hozzá ellenfoltként (az összes elszíneződött baktériumsejtet színezi).
- A saválló baktériumok pirosak maradnak, míg a nem saválló baktériumok kékre festődnek.
Mi a hasonlóság a Gram-festés és a savállóság között?
- A Gram festés és az Acid fast két különböző festési technika.
- Mindkét technika két csoportba sorolja a baktériumokat.
- Mindkét technika két foltot és egy színtelenítést használ.
Mi a különbség a Gram-festés és a savállóság között?
Gram folt vs saválló |
|
| A Gram-festés egy differenciális festési technika, amely a baktériumokat két csoportra osztja: Gram-pozitív baktériumok és Gram-negatív baktériumok. | A saválló festés egy megkülönböztető festés, amelyet a saválló és nem saválló szervezetek azonosítására használnak. |
| Elsődleges folt | |
| A kristályibolya a leggyakrabban használt elsődleges folt a grammfestésnél. | A karbol-fukszin a savállóság elsődleges foltja. |
| Színtelenítő szer | |
| 95%-os alkoholt használnak színtelenítő szerként a gramm foltok esetében. | A savas alkoholt színtelenítő szerként használják savgyorsításnál. |
| Counter Stain | |
| A Gram festés szafranint használ ellenfoltként. | A saválló festés metilénkéket használ ellenfestékként. |
| Megfigyelés | |
| A Gram-negatív baktériumok pick színben, a Gram-pozitív baktériumok pedig lila színben figyelhetők meg. | A saválló baktériumok vörös színben, a nem saválló baktériumok pedig kék színben figyelhetők meg. |
Összefoglaló – Gram-festés vs saválló
A mikroorganizmusokat élő állapotban nehéz megjeleníteni. Ezért a biológiai festéseket és festési eljárásokat széles körben alkalmazzák tulajdonságaik tanulmányozására. A differenciális festés a baktériumok megkülönböztetésére használt festési technika egyik típusa. A Gram-festés és a saválló festés két különböző festési technika. A Gram-festés sejtfaluk vastagsága alapján megkülönbözteti a gram-negatív és a gram-pozitív baktériumokat. A saválló festés megkülönbözteti a saválló baktériumokat a nem saválló baktériumoktól a sejtfal mikolsavtartalma alapján. Ez a különbség a saválló és a gramfolt között.
A Gram Stain vs Acid Fast PDF verziójának letöltése
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet jegyzetének megfelelően. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen: Különbség a Gram-festés és a savállóság között.
