Fő különbség – Transzformánsok vs Rekombinánsok
A rekombináció és az átalakulás a géntechnológia két kulcsfontosságú lépése, ahol egy organizmus tulajdonságait szándékosan módosítják genetikai anyagának manipulálásával. A rekombináció egy olyan folyamat, amelynek során idegen DNS-t építenek be a vektor genomjába, és rekombináns DNS-molekulát hoznak létre. Az átalakulás a következő lépés, amelyben a rekombináns molekula bejut a gazdaszervezetbe. A gazdasejt vagy a szervezet elősegíti a rekombináns molekula expresszióját. A transzformánsok és a rekombinánsok közötti kulcsfontosságú különbség az, hogy a transzformánsok azok a sejtek vagy organizmusok, amelyek rekombináns molekulát visznek be, és elősegítik az expressziót, míg a rekombinánsok azok a vektorok, amelyek lehetővé teszik az idegen DNS beillesztését a genomjába, és transzformációt a gazdatranszformánsokba az expresszióhoz.
Mik azok a transzformánsok?
A transzformánsok azok a sejtek vagy organizmusok, amelyekben a rekombináns DNS-t felveszik az expresszióhoz. A baktériumokat gyakran használják gazdaszervezetként a géntechnológiában, mivel laboratóriumi körülmények között könnyen termeszthetők, szaporodnak és kezelhetők, és a transzformációs folyamat más szervezetekhez képest egyszerű. A géntechnológiában használt legnépszerűbb gazdabaktérium az E coli baktérium.
A transzformációs folyamat során a gazdasejteket arra késztetik, hogy felvegyék a rekombinánsokat. Egyes gazdasejtek azonban nem vesznek fel rekombináns molekulákat. Nem transzformánsként ismertek, a rekombináns DNS-molekulákat tartalmazó sejteket pedig transzformánsoknak nevezzük. A transzformánsok nem transzformánsokból történő szelekciója a molekuláris biológiában szelekciós markerek segítségével történik. A szelekciós markereket a DNS inszerttel együtt inszertálják a vektor genomba. Az általánosan használt szelektálható markerek az antibiotikum-rezisztens gének. A marker gének elősegítik a transzformánsok differenciálódását és folytatják a folyamatot. A transzformációs folyamat után a baktériumot antibiotikumot tartalmazó tápközegben tenyésztik. Csak a transzformánsok képesek növekedni ezen a táptalajon, mivel bennük vannak a rekombinánsok.
Miután a rekombináns DNS-molekula átalakul a gazdaszervezeten belül, az idegen DNS vagy beépülhet a gazdasejt genomjába, vagy nem integrálódva maradhat a citoplazmában. Az idegen DNS expressziója és replikációja azonban a gazdaszervezetben történik, és a folyamat a kívánt eredményt hozza létre.
Mik azok a rekombinánsok?
A rekombináns olyan szervezet vagy sejt, amely idegen DNS-t tartalmazó rekombinált genommal rendelkezik. A rekombinánsok a géntechnológiai folyamat eredménye. Mesterségesen állítják elő őket in vitro a számunkra érdekes gének beépítésével és a genom módosításával. Gyakran a bakteriális plazmidok és bakteriofágok rekombinánsként működnek a géntechnológiában. Különböző DNS-ekből álló kiméra van. A rekombináns DNS-molekula idegen DNS-t szállít a gazdaszervezethez, és kifejezi és a kívánt terméket képezi.
A rekombináns molekulákat restrikciós endonukleázok és DNS-ligázok felhasználásával állítják elő. A kívánt DNS-fragmenst elválasztjuk az eredeti organizmustól, és beillesztjük a vektorba, hogy a transzformációhoz szükséges rekombinánst előállítsuk. A kérdéses gén levágását és a vektorszervezet felnyitását ugyanazzal a restrikciós enzimmel kell végezni, hogy kompatibilis ragadós végeket hozzanak létre, amelyek összekapcsolják őket. Miután az idegen DNS beépült a vektor genomjába, rekombináns vagy rekombináns DNS-molekula néven ismert.
02. ábra: Rekombináns DNS
Mi a különbség a transzformánsok és a rekombinánsok között?
Transformánsok vs Rekombinánsok |
|
| A transzformánsok azok a sejtek, amelyekben rekombináns DNS-molekula található. | A rekombinánsok azok a hordozómolekulák, amelyek saját genomjába idegen DNS-t inszertálnak. |
| Idegen DNS kifejezése | |
| Ők azok a gazdasejtek, amelyek képesek kifejezni a rekombináns DNS-t. | Képeseknek kell lenniük a gazdaszervezeten belüli önszaporodásra. |
| Kiválasztás | |
| A könnyen tenyészthető és szaporítható sejteket gazdasejtekként választjuk ki. | Könnyen kivonhatónak kell lenniük, és választható markereket kell tartalmazniuk. |
Összefoglaló – Transzformánsok vs Rekombinánsok
A transzformánsok azok a sejtek vagy szervezetek, amelyekben rekombináns DNS-molekulák találhatók. A rekombinánsok azok az organizmusok vagy sejtek, amelyek genetikai rekombináción mentek keresztül, és genomjukban idegen DNS található. A baktériumsejteket gyakran használják gazdasejtként a transzformációhoz, a plazmidokat és bakteriofágokat pedig gyakran alkalmazzák vektorként a rekombináns DNS-technológiában. Ez a különbség a transzformánsok és a rekombinánsok között.
