A ZFN TALEN és a CRISPR közötti kulcsfontosságú különbség az, hogy a ZFN egy ember által készített génszerkesztési technika, amely egy cink ujj doménből és egy Fok1 endonukleáz doménből álló cink ujj nukleázokon alapul. Eközben a TALEN egy mesterséges génszerkesztési technika, amely egy bakteriális TALE fehérjéből és Fok1 endonukleázból álló fúziós fehérjéken alapul, a CRISPR pedig egy természetes RNS alapú bakteriális védekező mechanizmus, amelyet kétféle RNS és kapcsolódó Cas fehérje vezérel.
A génszerkesztő eszközök a szekvencia-specifikus kötődoménekből és nem specifikus DNS-hasítási modulokból álló mesterséges nukleázokon alapulnak. A ZFN, a TALEN és a CRISPR háromféle génszerkesztési technika. A ZEN és a TALEN ember alkotta rendszerek, míg a CRISPR egy baktériumokban előforduló természetes rendszer. Mindhárom rendszer felismeri a szekvenciákat és hasítja a cél DNS-t. A cink ujj nukleázok egy cink ujj doménből és Fok1 endonukleázból állnak. A TALEN-ek bakteriális TALE fehérjéből és Fok1 endonukleázból állnak. A CRISPR két RNS-ből áll (transzaktiváló crRNS és egyetlen vezető RNS).
Mi az a ZFN?
A ZFN egy cink-ujj nukleázokon alapuló génszerkesztő eszköz. A cink ujj nukleázok kiméra nukleázok, amelyek szekvencia-specifikus DNS-kötő doménekből és a FokI restrikciós endonukleázból származó nem specifikus DNS-t hasító doménekből állnak. Ez egy ember alkotta genomszerkesztési technológia, amely a génmódosítások széles skáláját teszi lehetővé azáltal, hogy kettős száltörést idéz elő a DNS-ben.
01. ábra: ZFN
A ZFN fontos eszköz a növények és számos növényfaj célzott változtatásainak bevezetéséhez. Lehetővé teszi értékes tulajdonságok beépítését a növényekbe. Ezenkívül a ZFN terápiás potenciállal is rendelkezik, mivel képes precíz genetikai módosításra a tünetek hatékony megszüntetése érdekében.
Mi az a TALEN?
A Transzkripciós aktivátorszerű nukleázok (TALEN) egy génszerkesztő eszköz, amely a ZFN-hez hasonló kiméra nukleázokon alapul. Ez is egy ember alkotta genomszerkesztő technológia. A TALEN génmódosítást indukál azáltal, hogy kettős szál szakadást idéz elő a DNS-ben. A TALEN-ek szekvencia-specifikus DNS-kötő doménekből állnak, amelyek egy nem specifikus DNS-hasítási modulhoz vannak fuzionálva. Ezért FokI hasítási doménekkel és TALE fehérjékből származó DNS-kötő doménekkel rendelkezik.
02. ábra: TALEN
TALE fehérjék a természetben előfordulnak a Xanthomonas baktérium nemzetségben. Ezek a fehérjék DNS-kötő doméneket tartalmaznak, amelyek 33-35 aminosavból álló ismétlődő doménekből állnak. A TALEN egyik fő előnye a ZFN-nel szemben, hogy a DNS-kötő domén kötési specifitása megváltoztatható a TALEN-ben a 33-34 aminosav ismétlődésének módosításával.
Mi az a CRISPR?
A CRISPR a Clustered Regulatory Interspaced Short Palindromic Repeats rövidítése. Ez egy természetes RNS alapú védekező mechanizmus, amelyet baktériumokban hajtanak végre. Valójában ez egy genomszerkesztő mechanizmus, amelyet különösen vírusok ellen használnak. Egy vírus vagy egy idegen betolakodó aktiválhatja ezt a rendszert a baktériumokban. A CRISPR együtt működik a CRISPR-hez kapcsolódó fehérjével (Cas9).
A CRISPR két RNS-ből áll: a transzaktiváló crRNS-ből és egy irányító RNS-ből. Ezért a CRISPR felismerése mindkét RNS-től függ. Amikor a vírus DNS belép egy baktériumsejtbe, a CRISPR lókusz irányító RNS-t termel, amely a Cas fehérjéket kíséri, hogy elérjék és megkötődjenek a vírus DNS-sel, és egy adott helyen hasadjanak. A vírus DNS-ének hasítása után a kórokozó DNS elnémulása miatt inaktívvá válik. Ezért a CRISPR rendszer befogja, hasítja és inaktiválja a vírusokat a Cas fehérjék segítségével.
03. ábra: CRISPR/Cas9
A CRISPR/Cas9 genomszerkesztő rendszerként használatos. Ez egy új technológia. Ez a technológia nagyon egyszerű, hatékony és költséghatékony a többi genomszerkesztési technikához képest. A ZFN-nel és a TALEN-nel összehasonlítva a CRISPR/Cas9 rendszer hatékony eszköz a célzott genomváltozások indukálására.
Mi a hasonlóság a ZFN TALEN és a CRISPR között?
- ZFN, TALEN és CRISPR génszerkesztési technikák.
- Mindhárom eszköz ígéretes technika lesz számos betegség mögött meghúzódó genetikai okok kijavításában.
- Azonban korlátokat mutatnak a célzásban, a tökéletlen specifitásban és a géncélzásban.
- Mindhárom rendszer képes kettős szál szakadást előidézni.
Mi a különbség a ZFN TALEN és a CRISPR között?
A ZFN egy cink ujj nukleázokon alapuló génszerkesztési technika, míg a TALEN egy bakteriális TALE fehérjéből és Fok1 endonukleázból álló fúziós fehérjéken alapuló génszerkesztő technika, a CRISPR pedig egy természetes RNS alapú bakteriális védekező mechanizmus, amelyet vezérelnek. kétféle RNS és a kapcsolódó Cas fehérjék által. Tehát ez a legfontosabb különbség a ZFN TALEN és a CRISPR között.
Az alábbi infografika táblázatos formában sorolja fel a ZFN TALEN és a CRISPR közötti különbségeket egymás melletti összehasonlítás céljából.
Összefoglaló – ZFN vs TALEN vs CRISPR
A ZFN, a TALEN és a CRISPR génszerkesztő technológiák. A CRISPR a legújabb technológia, amely jobb hatékonyságot, megvalósíthatóságot és többfunkciós klinikai alkalmazást mutat. A ZFN és a TALEN is ember által készített mesterséges eszközök, míg a CRISPR egy baktériumvédelmi mechanizmus. A ZFN és a TALEN is mesterséges nukleázok. A CRISPR két RNS-típusból áll, amelyek Cas-fehérjékhez kapcsolódnak. Így ez a ZFN TALEN és a CRISPR közötti különbség összefoglalása.
