A legfontosabb különbség a fordított fázisú és a normál fázisú HPLC között az, hogy a fordított fázisú HPLC nem poláris állófázis és poláris mozgófázis, míg a normál fázisú HPLC poláris állófázis és kevésbé poláris mozgófázis.
A normál fázisú HPLC a HPLC legrégebbi technikája, amelyet Tswett a növényi kivonatok elválasztása során alkalmazott; üvegoszlopban krétát használt. Ez volt a kromatográfia klasszikus módja, ami miatt elnevezték „normál” technikának. A fordított fázisú HPLC ezzel szemben a normál technika ellentéte, amelyet a tudósok az utóbbi időben fejlesztettek ki.
Mi az a fordított fázisú HPLC?
A fordított fázisú HPLC egy kromatográfiás technika, amelyben hidrofób állófázist használunk. Az összes HPLC módszer közül ezt a módszert körülbelül 70%-ban alkalmazzuk széleskörű alkalmazhatósága és reprodukálhatósága miatt. Az állófázis nem poláris, a mozgófázis pedig poláris.
A tudósok legtöbbször vizes víz keveréket használnak elegyedő, poláros szerves oldószerrel, például acetonitrillel vagy metanollal mozgófázisként. Ezért az analitok kölcsönhatásba lépnek a nem poláris állófázissal.
Mi az a normál fázisú HPLC?
A normál fázisú HPLC egy kromatográfiás technika, amelyben hidrofil állófázist használunk. Ez a HPLC hagyományos módszere, bár nem nagyon használjuk. Az állófázis poláris, a mozgófázis pedig nem poláris. Ennél is fontosabb, hogy ennek a technikának a mozgó fázisa 100%-ban szerves. Ez azt jelenti, hogy ehhez nem használnak vizet.
01. ábra: Mintaprofil normál fázisú és fordított fázisú HPLC kromatogramokhoz az analitban lévő komponensek polaritásának megfelelően.
Az állófázis jellemzően szilícium-dioxidot, ciano-, diolt, amino-kötésű fázisokat tartalmaz, stb. A mozgófázisok közé tartoznak a szerves oldószerek, mint például a hexán, etil-acetát stb. Ez a technika az oldószer vagy analit molekulák visszatartásán alapul. poláris állófázis.
Mi a különbség a fordított fázisú és a normál fázisú HPLC között?
A fordított fázisú HPLC egy kromatográfiás technika, amelyben hidrofób állófázist használunk. Ennek a technikának az állófázisa nem poláris, míg a mozgó fázis poláris. Ezenkívül a tudósok a fordított fázisú HPLC-ben mozgófázisként egy elegyedő, poláros szerves oldószerrel, például acetonitrillel vagy metanollal alkotott vizes keveréket használnak. Ezzel szemben a normál fázisú HPLC egy kromatográfiás technika, amelyben hidrofil állófázist használunk. Ennek a technikának az állófázisa poláris, míg a mozgó fázis nem poláris. Emellett a tudósok szerves oldószereket, például hexánt, etil-acetátot stb. használnak a normál fázisú HPLC mozgófázisaként. Az alábbi infografika táblázatos formában mutatja be a fordított fázisú és a normál fázisú HPLC közötti különbséget.
Összefoglaló – fordított fázisú és normál fázisú HPLC
A fordított fázisú és a normál fázisú HPLC technikák két folyadékkromatográfiás technika. A fő különbség a fordított fázisú és a normál fázisú HPLC között az, hogy a fordított fázisú HPLC egy nem poláris állófázist és egy poláris mozgó fázist használ, míg a normál fázisú HPLC poláris állófázist és kevésbé poláris mozgófázist használ.
