A radioaktív és nem radioaktív próbák közötti legfontosabb különbség az, hogy a radioaktív próbák egyszálú DNS- vagy RNS-szekvenciák, amelyek radioaktív izotópokkal vannak megjelölve, míg a nem radioaktív próbák egyszálú DNS- vagy RNS-szekvenciák, amelyek kémiai címkével vagy címkével vannak megjelölve. fluoreszkáló címke.
A nukleinsav-hibridizáció fontos technika a molekuláris biológiában, különösen a mikrobiológiai diagnosztikában. Segít azonosítani vagy kimutatni egy adott nukleinsavszekvenciát. Ebben a technikában a nukleinsavakat szilárd felülethez rögzítik, és egy próbával hibridizálják. A próba egy DNS- vagy RNS-fragmens, amely komplementer a kérdéses szekvenciával. Ha a célszekvencia jelen van a mintában, a próba hibridizálódik vele, és kimutathatóvá teszi. A szondáknak két típusa van: radioaktív és nem radioaktív szonda. Ezért a szondákat radioaktív címkével vagy fluoreszcens címkével jelölhetjük meg.
Mik azok a radioaktív szondák?
A radioaktív próbák radioaktív címkével ellátott egyszálú DNS- vagy RNS-fragmensek. A radioaktív szondák előállításához radioizotópokat használnak. A 32P, 33P és 35S radioizotópokat általában a szondák jelölésére használják. Ezenkívül a 3H és 1251 radioizotópokat is kisebb mértékben használják a szondák jelölésére. De speciális alkalmazásokhoz használják őket. A különböző radioizotópok közül a 32P a leggyakrabban használt izotóp a radioaktív szondák jelölésére.
A radioaktív szondák nagyobb fokú megbízhatóságot és specifitást biztosítanak. Ezért maximális érzékenységet biztosítanak, és lehetővé teszik a célszekvenciák pontos mennyiségi meghatározását. A radioaktív szondáknak azonban számos hátránya van. Rövid felezési idejük van. Ezen túlmenően veszélyesek, és az előállítás, a felhasználás és az ártalmatlanítás problémát okoz a kezelés során. Ezenkívül a radioaktív szonda előkészítése költséges folyamat. Ezért a biztonsági kérdések és a költségek miatt a radioaktív szondákat manapság nem használják nem radioaktív szondákként.
Mik azok a nem radioaktív szondák?
A nem radioaktív szondák a kémiailag jelölt szondák második típusa. A digoxigenin egy nem radioaktív próba, amely egy antitest alapú marker. A digoxigenin próbák specifikusak és érzékenyek. A biotin egy másik címke, amelyet a nem radioaktív szonda előkészítésében használnak. A biotin/sztreptavidin és a digoxigenin/antitest kimutatási rendszerek a hibridizáció során leggyakrabban használt nem radioaktív próbák. Ezenkívül a torma-peroxidáz rendszer egy másik nem radioaktív vizsgálórendszer. Miután ezeket a nem radioaktív próbákat hibridizálták a célszekvenciákkal, autoradiográfiával vagy más képalkotó technikákkal kimutathatók.
01. ábra: Hibridizálás nem radioaktív szondákkal
Nem radioaktív próbákat gyakrabban használnak nukleinsav-hibridizációban, mint radioaktív próbákat. Ennek az az oka, hogy a nem radioaktív szondák nem kapcsolódnak veszélyes anyagokhoz. Ezenkívül a nem radioaktív detektálási módszerek rövidebb expozíciós időt igényelnek a hibridizációs jel detektálásához. A nem radioaktív próbákkal végzett DNS-hibridizáció lépései azonban általában fárasztóak és időigényesek. Ráadásul a kereskedelemben kapható megoldások drágák.
Mi a hasonlóság a radioaktív és a nem radioaktív szondák között?
- A radioaktív és nem radioaktív próbák a nukleinsav-hibridizációban használt kétféle próba.
- Megkönnyítik a célszekvenciák kimutatását a mintában.
- Mindkét típusú szonda egyformán érzékeny és specifikus.
Mi a különbség a radioaktív és a nem radioaktív szondák között?
A radioaktív próbák radioaktív izotópokkal jelölt egyszálú DNS- vagy RNS-szekvenciák, míg a nem radioaktív próbák kémiai címkével jelölt egyszálú DNS- vagy RNS-szekvenciák. Tehát ez a legfontosabb különbség a radioaktív és a nem radioaktív szondák között. Ezenkívül a radioaktív izotópok veszélyesek. Ezért a radioaktív szondák jelentősen veszélyesek, míg a nem radioaktív szondák nem veszélyesek.
Sőt, egy másik különbség a radioaktív és nem radioaktív szondák között a hátrányaik. A radioaktív szondák használatának hátránya a rövid felezési idő, valamint az előállításukkal, felhasználásukkal és ártalmatlanításukkal kapcsolatos veszélyek. Másrészt a nem radioaktív próbákkal végzett DNS-hibridizáció lépései általában fárasztóak és időigényesek.
Az alábbi infografika több összehasonlítást mutat a radioaktív és nem radioaktív szondák közötti különbséggel kapcsolatban.
Összefoglaló – Radioaktív vs nem radioaktív szondák
A próba egy DNS- vagy RNS-fragmens, amely a kérdéses szekvenciával komplementer nukleotidszekvenciát tartalmaz. A célszekvencia kimutatása érdekében a próbák radioaktívan, fluoreszcensen vagy kémiailag jelölhetők. A próbák komplementer szekvenciákkal kötődnek a mintában. A radioaktív szondákat radioaktív izotópokkal, míg a nem radioaktív próbákat biotinnal, digoxigeninnel vagy torma-peroxidázzal jelölik. Így ez a legfontosabb különbség a radioaktív és a nem radioaktív szondák között.
