Fő különbség – elsődleges sejtkultúra vs sejtvonal
A kutatás területe jelentős fordulatot vett a sejttenyésztés bevezetésével és a sejtvonalak kutatási felhasználásával. Különböző teszteket végeznek mesterségesen előállított sejteken és sejtvonalakon a sejt viselkedésének felmérésére. A legtöbb humán alapú kutatás sejttenyésztést és sejtvonalakat igényel az eredmények validálásához, különösen, ha a kutatási tanulmányok farmakológián és gyógyszerkutatáson alapulnak. Az elsődleges sejttenyészet olyan tenyészet, amelyet a sejtek mechanikai vagy enzimatikus módszerekkel történő közvetlen izolálásával állítanak elő. Egy sejtvonalat úgy állítunk elő, hogy egy primer sejttenyészetet folyamatosan passzálunk, hogy homológ karaktereket szerzett sejtvonalat kapjunk. A legfontosabb különbség az elsődleges sejttenyészet és a sejtvonal között a passzálási idők száma. Az elsődleges sejttenyészetet közvetlenül izolálják, míg a sejtvonalat úgy készítik elő, hogy egy primer sejttenyészetet többször átpasszolnak.
Mi az elsődleges sejtkultúra?
Az elsődleges sejttenyészet olyan sejttenyészet-készítmény, amely a sejteket közvetlenül a forrástól mechanikus vagy enzimatikus módszerekkel izolálja. A sejteket tripszinezéssel vagy nem tripszinezési módszerrel izoláljuk. Az elsődleges sejttenyészeteket megfelelő tápközegben növesztjük, amely növekedési faktorokat, hormonokat, lipideket és más, meghatározatlan komponenseket tartalmaz. Bizonyos tápközegeket szérumnak kell kísérnie. A táptalaj biztosítja, hogy a növekedés feltételei optimalizálva legyenek, és a sejtek optimális körülmények között maradjanak életben. A sejteket különböző szöveti forrásokból, például májszövetből, endotéliumból és idegszövetből izolálhatjuk emberekben vagy magasabb rendű állatokban tripszinezéssel.
A sejtek növényekből és mikroorganizmusokból történő izolálásakor speciális extrakciós eljárásokat alkalmaznak, amelyek mechanikai és kémiai módszereket is alkalmaznak. Ezeket az izolált sejteket szilárd hordozóra rögzíthetjük, vagy több generáción keresztül passzálhatjuk, hogy sejtvonalká fejlődjenek.
Az elsődleges sejttenyészetek főként két típusból állnak; Tapadó sejtkultúrák és szuszpenziós sejttenyészetek. A tapadó primer sejttenyészetek lehorgonyzásfüggőek, és szilárd támaszt igényelnek a növekedéshez. A hozzátapadt primer sejttenyészetek főként szövetekből vagy szervekből származnak. A szuszpenziós primer sejttenyészetek lehorgonyzástól függetlenek, és folyékony tápközegben nőnek. A szuszpenziós tenyészeteket a növekedési fázis alatt folyamatosan keverni kell. A szuszpenziós primer sejttenyészetek egyenesen vérből származhatnak.
Az elsődleges sejttenyészetek élettartama viszonylag rövidebb, de az elsődleges sejttenyészetekből in vitro körülmények között nyert információk számos tanulmány alapját adják. Hasznosak a sejtjellemzők tanulmányozására, mind a morfológiai, mind a kémiai viselkedésre.
Mi az a sejtvonal?
A sejtvonalakat széles körben használják a kutatásban, és jelenleg olyan sejtvonalak, mint a rákos sejtvonalak, májsejtvonalak és vese sejtvonalak kereskedelmi forgalomban kaphatók kutatási célokra. A sejtvonalakat primer sejttenyészet folyamatos passzálásával állítják elő. A passzálás azt a továbbtenyésztési folyamatot jelenti, amelynek során a sejttenyészeteket sejtvonalzá fejlesztik. Ezek a sejtvonalak kétdimenziós vagy háromdimenziós mátrixban lévő tenyészetek, amelyeket sejtvonalként tartanak fenn.
A sejtvonalak véges és folytonos sejtvonalakként vannak besorolva. A véges sejtvonalakat meghatározott számú (20-30 passzázs) átoltásnak vetjük alá. A szükséges számú passzázs befejezése után a sejtvonal az öregedés szakaszába lép. Ezeket a sejteket könnyű kezelni, mivel növekedésük határozott. A folytonos sejtvonalakat immortalizált sejtvonalaknak is nevezik. Ezek a sejtvonalak nem rendelkeznek meghatározott számú passzázssal. Korlátlan ideig nőnek, és így képesek mutációkat szerezni. Ezért a folytonos sejtvonalak könnyen mutálódnak, így morfológiai és genetikai jellemzőik megváltoznak, ellentétben a véges sejtvonalakkal.
01. ábra: sejtvonal
A sejtvonalakat azért használjuk, mert kényelmesebb, mint az elsődleges sejttenyészet használata, mivel egy bizonyos ideig újra és újra felhasználható. De hajlamosabb a mutációkra és szennyeződésekre, mivel szaporodásuk fokozódik.
Mi a hasonlóság az elsődleges sejttenyészet és a sejtvonal között?
- Mind a sejtkultúra, mind a sejtvonal típusú sejteket a sejtek morfológiai, kémiai és genetikai jellemzőinek tanulmányozására használják.
- Mind a sejtkultúra, mind a sejtvonal típusú sejteket mechanikus és enzimatikus módszerekkel vonják ki.
- Mind a sejttenyészet, mind a sejtvonal típusú sejtek növekedési tápközeget és specifikus növekedési körülményeket igényelnek.
- Mind a sejtkultúra, mind a sejtvonal típusú sejtek hajlamosak a mutációkra.
Mi a különbség az elsődleges sejttenyészet és a sejtvonal között?
Primer sejtkultúra vs sejtvonal |
|
| Az elsődleges sejttenyészet olyan tenyészet, amelyet a sejtek mechanikai vagy enzimatikus módszerekkel történő közvetlen izolálásával állítanak elő. | Egy sejtvonalat úgy készítenek elő, hogy egy primer sejttenyészetet folyamatosan passzálnak, hogy olyan sejtvonalat kapjanak, amely homológ karaktereket szerzett. |
| Vágások száma | |
| Az elsődleges sejttenyészeteket nem passzálják, a sejteket tenyésztési körülmények között tartják fenn. | A sejtek határozottan vagy korlátlanul passzálódnak a sejtvonalak létrehozása során. |
| Típusok | |
| Az adherens primer sejttenyészet és a szuszpenziós primer sejttenyészet az elsődleges sejttenyészetek két típusa. | A véges sejtvonal és a folyamatos sejtvonal kétféle sejtvonal. |
| Élettartam | |
| Az elsődleges sejttenyészetek rövid élettartamúak. | A sejtvonalak élettartama hosszabb. |
Összefoglaló – Elsődleges sejtkultúra vs sejtvonal
Az elsődleges sejttenyészeteket és sejtvonalakat széles körben használják a kutatásban a különböző sejtek viselkedési mintáinak tanulmányozására különböző körülmények között és különböző farmakológiai szempontok mellett. Az elsődleges sejttenyészeteket közvetlenül izoláljuk a forrás szervből vagy szövetből, és tenyésztő táptalajon tenyésztjük. A körülmények az adott sejtek növekedéséhez optimalizáltak. Ezzel szemben a sejtvonalakat úgy állítják elő, hogy az elsődleges sejttenyészeteket véges vagy végtelen számú alkalommal passzálják. A sejtvonalak kereskedelmi forgalomban kaphatók, és a könnyű használhatóság miatt népszerűek a kutatók körében.
