A legfontosabb különbség a DNS- és RNS-próbák között az, hogy a DNS-próbák olyan DNS-fragmensek, amelyek komplementerek a célnukleotid-szekvenciákkal, míg az RNS-próbák egyszálú RNS-szakaszok, amelyek a célszekvenciák komplementer nukleinsavszekvenciái.
A próba DNS vagy RNS mesterségesen szintetizált rövid szekvenciája, amely radioaktívan vagy nem radioaktív molekulákkal jelölhető. Hossza 100-1000 bázis lehet. A próbák hasznosak a próba szekvenciájával komplementer célnukleotid szekvenciák kimutatására. Miután hozzáadták, a próbák hibridizálódnak a komplementer szekvenciákkal vagy a célszekvenciákkal, és láthatóvá teszik a célszekvenciák azonosítását, mivel radioaktivitást hordoznak. A szondák számos mikrobiális és molekuláris területen fontos molekuláris eszközök, mint például a genetikai betegségek kimutatása, a virológia, a törvényszéki patológia, az apasági vizsgálat, a DNS-ujjlenyomat-vétel, az RFLP, a molekuláris citogenetika, az in situ hibridizáció stb.
Mik azok a DNS-szondák?
DNS-próbák a DNS egyszálú szakaszai. Használhatók komplementer nukleinsavszekvenciák (célszekvenciák) jelenlétének kimutatására hibridizációval. Miután egy DNS-próba hibridizálódott komplementer szekvenciájával, kettős szálú hibridet alkot. Kimutatásuk érdekében a DNS-próbákat általában radioizotópokkal, biotinnal, epitópokkal vagy fluoroforokkal jelölik. A biotinnal jelölt DNS-próbák sztreptavidinnel jelölt alkalikus foszfatázzal kimutathatók számos enzimatikus és kémiai módszerrel.
01. ábra: DNS-szonda
A DNS-próba nukleotidszekvenciája ismert. Ezek 100-1000 bázispár hosszúságú rövid szekvenciák. Hosszú DNS-próbák állíthatók elő rekombináns DNS-technológiával. PCR-rel és klónozással is előállíthatók. A klinikai mikrobiológiai laboratóriumokban könnyen elérhetők DNS-próbák a fertőző betegségek gyors diagnosztizálására.
Mik azok az RNS-szondák?
RNS-próbák az RNS egyszálú szakaszai. Ezek komplementer szekvenciák a mintában lévő célszekvenciákkal. Általában az SP6, T7 vagy T3 bakteriofágokból származó RNS polimerázokkal szintetizálják DNS in vitro transzkripciójával. Hosszú RNS-próbák állíthatók elő in vitro transzkripcióval linearizált plazmid DNS-ből. Általában az RNS-próbák erősen és szorosabban kötődnek komplementer szekvenciáikhoz, mint a DNS-próbák. A DNS-próbákhoz hasonlóan az RNS-próbák is jelölhetők az átírásuk közben.
Mi a hasonlóság a DNS- és az RNS-próbák között?
- Mind a DNS-, mind az RNS-próbák egyszálú nukleotidszekvenciák.
- Mindkettő mesterségesen tervezett és szintetizált.
- Sőt, radioizotópokkal, epitópokkal, biotinnal vagy fluoroforokkal is jelölhetők.
- Erős affinitásuk van egy meghatározott DNS- vagy RNS-célszekvenciához.
- Különböző blottolási és in situ hibridizációs technikákban használják a célnukleinsav-szekvenciák kimutatására.
- Mindkét típusú próba hibridizálható komplementer szekvenciáikkal.
- Mikroorganizmusok azonosítására és fertőző, örökletes és egyéb betegségek diagnosztizálására is használják.
Mi a különbség a DNS- és az RNS-próbák között?
DNS próba a DNS egy rövid szakasza, amely komplementer a célszekvenciával. Másrészt az RNS próba a célszekvenciával komplementer RNS rövid, egyszálú szakasza. Így ez a legfontosabb különbség a DNS- és az RNS-próbák között. Ezenkívül a DNS-próbák A-t, T-t, C-t és G-t, míg az RNS-próbák A-t, U-t, C-t és G-t tartalmaznak.
További különbség a DNS- és RNS-próbák között a termodinamikai stabilitásuk. Az RNS-próbák nagyobb termodinamikai stabilitást mutatnak, mint a DNS-próbák.
Az alábbi infografika táblázatba foglalja a DNS- és RNS-próbák közötti fontos különbségeket.
Összefoglaló – DNS vs RNS szondák
A próba egy kis DNS- vagy RNS-fragmens, amelyet egy adott szekvencia jelenlétének kimutatására használnak a DNS- vagy RNS-mintában molekuláris hibridizációval. A DNS-próbák rövid egyszálú DNS-fragmensek, míg az RNS-próbák rövid egyszálú RNS-szekvenciák. Ezek ismert sorozatok. A termodinamikai stabilitás nagyobb az RNS-próbákban, mint a DNS-próbákban. Az RNS-próbák szorosan kötődnek komplementer szekvenciáikhoz, mint a DNS-próbák. Így ez összefoglalja a DNS- és RNS-próbák közötti különbséget.
