Kulcskülönbség – HPLC vs HPTLC
A legfontosabb különbség a HPLC és a HPTLC között az, hogy a HPLC lehetővé teszi a komponensek mennyiségi elválasztását a mintában, míg a HPTLC nem teszi lehetővé a mintában lévő komponensek mennyiségi elválasztását.
A kromatográfia egy fizikai elválasztási módszer, amelyet a keverék összetevőinek elkülönítésére és azonosítására használnak. A HPLC és a HPTLC is kromatográfiás technika. A HPLC egy nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. A HPTLC egy nagy teljesítményű vékonyréteg-kromatográfia.
Mi az a HPLC?
A HPLC egy nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. Ez egy analitikai technika, amelyet a keverék összetevőinek elkülönítésére, azonosítására és mennyiségi meghatározására használnak. Ennél a technikánál a mintát megfelelő oldószerben oldják fel. Ezután az oldószert a mintával egy adott nyomású szivattyún engedjük át. A szivattyú szilárd adszorbens anyaggal van feltöltve. Ekkor egyes komponensek erősen kötődnek az abszorbens anyaghoz, míg más komponensek lazán kötődnek. Ez azt eredményezi, hogy az alkatrészek eltérő áramlási sebességgel rendelkeznek a szivattyún keresztül. Ezért az összetevők könnyen szétválaszthatók.
01. ábra: HPLC-rendszer
A szivattyút kitöltő adszorbens anyagot állófázisnak nevezzük. Az oldott mintát tartalmazó oldószert mozgófázisnak nevezzük. Az ebben a technikában használt szivattyút oszlopnak nevezik. Az oszlopot adszorbens anyaggal töltik meg, leggyakrabban szilícium-dioxid részecskékkel. Ezeknek a részecskéknek a mérete 2-50 μm lehet. Az elválasztási folyamatot befolyásolja a mozgófázis összetétele és a rendszer hőmérséklete. Az állófázis és a mintában lévő komponens közötti kölcsönhatások lehetnek hidrofób kölcsönhatások, dipól-dipól kölcsönhatások, ionos kötések stb.
A HPLC üzemi nyomása lényegesen magasabb, mint a hagyományos folyadékkromatográfiáé. 50-350 bar körül van. A folyadékkromatográfia és a HPLC közötti különbség az, hogy a folyadékkromatográfiában a minta gravitáció hatására esik át az oszlopon, míg a HPLC-ben a minta nyomás alá kerül az oszlopon. Az oszlop mérete és az abszorbens részecskék is nagyon kicsik a hagyományos folyadékkromatográfiához képest. A HPLC technika által adott felbontás azonban jobb.
Mi az a HPTLC?
A HPTLC egy nagy teljesítményű vékonyréteg-kromatográfia. Ez a hagyományos TLC fejlett és automatizált formája. Ez a technika rövid időn belül hatékony felbontást biztosít. Ennél az elemzési módszernél a minta és a referencia egyidejűleg elemezhető, ami lehetővé teszi a minta összehasonlítását a referenciával. Jobb analitikai pontosságot biztosít, mint más kromatográfiás technikák. Az elemzéshez szükséges idő rövidebb. A technika egy olcsó technika.
02. ábra: Élelmiszerfestékek elemzése HPTLC-vel
A HPTLC-módszer egy egyszerű folyamat, és a minta-előkészítési lépés is kimarad (A hagyományos TLC-ben a minta-előkészítési lépést az elválasztás előtt tartalmazza. Ez a lépés tisztítást és dúsítást foglal magában). Az oldószer közvetlenül felhasználható előkezelés nélkül, bár más kromatográfiás technikák előkezeléseket igényelnek, mint például a gáztalanítás, szűrés stb.
A HPTLC-ben használt adszorbens anyag nagyon kis részecskeméretű szilícium-dioxid. A hagyományos TLC-ben a szilícium-dioxid részecskemérete 5-20 μm, míg a HPTLC-ben 4-8 μm. A mintát applikátor segítségével a HPTLC lemezre visszük fel. Egységes és biztonságos alkalmazást biztosít. Ezután a lemezeket a mozgó fázist tartalmazó kamrába helyezzük. A kamrát telíteni kell a mozgófázis gőzével. A HPTLC eljárás után az elmozdult foltok kimutathatók. A lemezen lévő foltok kimutatásakor a HPTLC technika megfelelő UV-tartományt vagy jódkamrát használ.
Mi a különbség a HPLC és a HPTLC között?
HPLC vs HPTLC |
|
| A HPLC egy nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. | A HPTLC egy nagy teljesítményű vékonyréteg-kromatográfia. |
| Technika | |
| HPLC-ben az oldószert tartalmazó mobil fázist egy állófázissal töltött oszlopon vezetik át. | A HPTLC-ben a mintát egy vékonyréteg-kromatográfiás lemezre foltozzák, és a mozgó fázist tartalmazó kamrába helyezik; majd a mintát hagyjuk a lemezen felfelé vándorolni a mozgó fázissal együtt. |
| Mérés | |
| A HPLC-ben a komponensek oszlopon áthaladó áramlási sebessége közötti különbségeket használják a mintában lévő komponensek elválasztására. | A HPTLC-ben a mintában szereplő egyes komponensek által megtett távolságok közötti különbségek a mintában lévő komponensek elkülönítésére szolgálnak. |
| Mennyiségi elkülönítés | |
| A HPLC lehetővé teszi az összetevők mennyiségi elkülönítését a mintában. | A HPTLC nem teszi lehetővé a mintában lévő komponensek mennyiségi elkülönítését. |
Összefoglaló – HPLC vs HPTLC
A HPLC és a HPTLC két kromatográfiás technika. A legfontosabb különbség a HPLC és a HPTLC között az, hogy a HPLC lehetővé teszi a mintában lévő komponensek mennyiségi elválasztását, míg a HPTLC nem teszi lehetővé a mintában lévő komponensek mennyiségi elválasztását.
