A legfontosabb különbség a HPLC és a gyors HPLC között az, hogy a HPLC-hez használt szivattyúnyomás körülbelül 40 MPa, míg a gyors HPLC-hez a szivattyúnyomás körülbelül 3-5 MPa.
A keverék összetevőinek szétválasztására használt leggyakoribb technika a „folyadékkromatográfia”. Számos technika létezik e cél elérésére, amelyek közül a HPLC nagyon népszerű. A HPLC a High Performance Liquid Chromatography rövidítése, amely gyorsan és hatékonyan azonosítja, mennyiségileg meghatározza és elválasztja a folyékony keverék összetevőit. A Fast HPLC a HPLC egy speciális alkalmazása, amely az utóbbi időben felkeltette az oldatok tanulmányozásában részt vevők figyelmét.
Mi az a HPLC?
A HPLC egy nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. Nagy nyomást használ az oldószerek nyomására, hogy azok áthaladjanak egy oszlopon. Ezenkívül ideális módja a különféle vegyületek, például aminosavak, nukleinsavak, szénhidrátok, szteroidok, antibiotikumok és szénhidrogének elkülönítésére és tanulmányozására. A HPLC számos előnnyel rendelkezik a keverékek elválasztásának más módszereivel szemben, mint például a nagyobb felbontás és a gyorsabb elemzés. Megszünteti az újracsomagolás és regenerálás szükségességét, és jobb a paraméterek ellenőrzése, ezáltal növelve az elválasztás hatékonyságát. Ideális esetben a HPLC alkalmas nagyméretű alkalmazásokhoz, mivel nagyon kis részecskéket képes elválasztani, és lehetővé teszi a nagy nyomások használatát, amelyek megkönnyítik az oldószerek áramlását.
01. ábra: HPLC oszlop
Röviden, a HPLC technika működési módja a következő. Először is be kell vezetnünk a mintát a mozgófázis áramába diszkrét kis mennyiségben egy szivattyú segítségével. A szivattyú nyomását 40 MPa értéken kell tartani. Ez a mozgófázis-áram átszivárog a HPLC oszlopon. Ezután a mintában lévő komponensek is áthaladnak az oszlopon. Mozgási sebességük azonban eltér egymástól, a mintakomponensek és az oszlopon belüli adszorbens közötti kölcsönhatások különbsége miatt. Ezt az adszorbenst állófázisnak nevezzük, mivel az oszlop belsejében található (nem mozog). Ezután az oszlop végén összegyűjthetjük az oszlopról eluálódó mintát, ezáltal a mintában lévő komponenseket külön-külön is összegyűjthetjük.
Mi az a gyors HPLC?
A közelmúltban a Schering Plow kutatóintézet kutatói kifejlesztettek egy gyors HPLC technikát, amely a HPLC továbbfejlesztett változata, mivel lehetővé teszi a vegyületek még gyorsabb elválasztását a keverékből. Ez a gyors HPLC néven is ismert technika 2,7 um-es olvasztott mag szilícium-dioxid részecskéket használ, amelyeket 0,5 um porózus szilícium-dioxid szilárd szilícium-dioxid részecskére való olvasztásával állítanak elő. Ezek az egyedileg elkészített részecskék nagyon felgyorsítják az elválasztási eljárást, ráadásul alacsony ellennyomás mellett is, mint amit a HPLC-ben használunk.
02. ábra: FPLC-készülék
A gyors HPLC az UPLC-vel összehasonlítható eredményeket ad, de a tudósok úgy vélik, hogy ez a technika jobb, mivel nem igényel túl drága ultramagas nyomású berendezést. Ami nagyszerű, az az, hogy a gyors HPLC nem igényel új laboratóriumi protokollokat.
Mi a különbség a HPLC és a gyors HPLC között?
A HPLC egy nagy teljesítményű folyadékkromatográfia, a gyors HPLC pedig a nagy teljesítményű folyadékkromatográfia egy fejlett formája. A legfontosabb különbség a HPLC és a gyors HPLC között az, hogy a HPLC-hez használt szivattyúnyomás körülbelül 40 MPa. Míg a szivattyú nyomása gyors HPLC-hez körülbelül 3-5 MPa. Ezen túlmenően a HPLC technikával különböző vegyületeket, például aminosavakat, nukleinsavakat, szénhidrátokat, szteroidokat, antibiotikumokat és szénhidrogéneket különíthetünk el, míg a gyors HPLC technikát főként fehérjék elválasztására használják.
Az alábbi infografika további információkat tartalmaz a HPLC és a gyors HPLC közötti különbségről.
Összefoglaló – HPLC vs gyors HPLC
A HPLC egy folyadékkromatográfiai technika, amely világszerte nagyon népszerűvé vált. A Fast HPLC a HPLC új verziója, a Schering Plough Institute kutatói fejlesztették ki ezt az új technikát. A legfontosabb különbség a HPLC és a gyors HPLC között az elválasztáshoz használt szivattyúnyomásban rejlik. Azaz; a HPLC-hez használt szivattyúnyomás körülbelül 40 MPa. De a szivattyú nyomása a gyors HPLC-hez körülbelül 3-5 MPa.
