A legfontosabb különbség a DNS- és az RNS-izolálás között az, hogy a DNS-izolálás egy olyan eljárás, amelyben egy DNS-nek nevezett nukleinsavat vonnak ki egy biológiai sejtből, míg az RNS-izolálás egy olyan eljárás, amelynek során az RNS-nek nevezett nukleinsavat biológiai sejtből nyerték ki.
A nukleinsav-izolálás a kiindulópont a későbbi alkalmazások széles körében. A kiindulási mintákban található nukleinsavak magas minősége kulcsfontosságú tényező a későbbi, későbbi alkalmazások sikerében. A nukleinsav-izolálást lépések sorozataként határozhatjuk meg, amelyek célja a nukleinsav kinyerése egy tisztaságú mintában, amely felhasználható különböző későbbi alkalmazási lépésekben. A nukleinsav-kivonás célja a sejtmembrán szétesése, valamint a lipidek és fehérjék maximális eliminációja, hogy tiszta nukleinsavakat, például DNS-t vagy RNS-t nyerjünk.
Mi az a DNS-izolálás?
A DNS-izolálás egy rutin eljárás, amelynek során egy DNS-nek nevezett nukleinsavat vonnak ki egy biológiai sejtből. A DNS izolálása a DNS vérből, fagyasztott szövetmintákból és paraffin szövetblokkokból történő kivonásával történik. A DNS izolálásának három fő lépése van, beleértve a sejtlízist, a DNS kivonását és a kicsapást. A sejtlízis során a mintában lévő sejteket gyakran fizikai eszközökkel, például őrléssel vagy vortexezéssel választják el egymástól, és sót tartalmazó oldatba helyezik. Általában a sóban lévő pozitív töltésű nátriumionok segítenek megvédeni a negatív töltésű foszfátcsoportokat, amelyek a DNS gerincén futnak. Később detergenst adnak hozzá, hogy lebontsák a sejtmembránban és a sejtmagokban lévő lipideket, amelyek DNS-t szabadítanak fel, amikor ezek a membránok felborulnak.
01. ábra: DNS izolálás
DNS-kivonást végeznek, hogy tiszta DNS-mintát kapjanak. Gyakran proteáz enzimet adnak hozzá a DNS-hez kapcsolódó fehérjék és más sejtfehérjék lebontására. Ezenkívül a sejttörmelék egy része eltávolítható a minta szűrésével. Végül a DNS-t alkohollal kicsapják. Továbbá, ha sok DNS van, az eljárás végén fukar fehér csapadék figyelhető meg.
Mi az RNS izolálás?
RNS-izolálás egy olyan eljárás, amelynek során egy RNS-nek nevezett nukleinsavat vonnak ki egy biológiai sejtből. Ezt az eljárást gyakran bonyolítja az RNS-t lebontó sejtekben és szövetekben lévő ribonukleáz enzimek jelenléte. A molekuláris biológiában számos módszert alkalmaznak az RNS mintákból történő izolálására, ilyen például a guanidinium-tiocianát-fenol-kloroform extrakció.
02. ábra: RNS izolálás
Az RNS izolálása általában több lépésből áll, beleértve a sejtlízist és homogenizálást, a biokémiai folyamatok leállítását, a nukleinsav megosztását, az RNS kinyerését, a nyers tisztítást és az RNS minőségének felmérését. A szűrőpapír alapú lízis és elúciós módszer nagy áteresztőképességgel rendelkezik az RNS extrakcióban. Ezenkívül az RNS folyékony nitrogénben történő extrakciója mozsártörővel szintén nagyon hasznos módszer, mivel megakadályozza a ribonukleáz aktivitást.
Mi a hasonlóság a DNS és az RNS izolálása között?
- A DNS- és RNS-izolálás a nukleinsav-izolálási eljárások két típusa.
- Mindkét eljárásnak hasonló alapvető lépései vannak, mint például a sejtlízis, extrakció és tisztítás.
- Ezek az eljárások olyan fontos nukleinsavtípusokat izolálnak, amelyek számos későbbi alkalmazással rendelkeznek.
- Laboratóriumi beállításokban hajtják végre.
- Ezek gyártott készletekkel is végrehajthatók.
Mi a különbség a DNS és az RNS izolálása között?
DNS-izolálás során a DNS-nek nevezett nukleinsav egy fajtáját egy biológiai sejtből vonják ki, míg az RNS-izolálásnál az RNS-nek nevezett nukleinsavat egy biológiai sejtből vonják ki. Így ez a legfontosabb különbség a DNS és az RNS izolálása között. Ezen túlmenően a DNS-izolálást általában körülbelül 7-8 pH-értéken, míg az RNS-izolálást általában körülbelül 4,5-ös pH-értéken hajtják végre.
Az alábbi infografika táblázatos formában mutatja be a DNS- és RNS-izolálás közötti különbségeket egymás melletti összehasonlítás céljából.
Összefoglaló – DNS vs RNS izolálás
A DNS- és RNS-izolálás a nukleinsav-izolálási eljárások két típusa. A DNS-izolálás egy olyan eljárás, amelynek során DNS-t vonnak ki egy biológiai sejtből. Az RNS izolálás egy olyan eljárás, amelynek során RNS-t vonnak ki egy biológiai sejtből. Tehát ez a legfontosabb különbség a DNS és az RNS izolálása között.
