Kulcskülönbség – áramlási citometria vs FACS
A sejtelmélet összefüggésében a sejtek minden élő szervezet alapvető szerkezeti és funkcionális egységei. A sejtválogatás egy olyan módszer, amelyet a különböző sejtek fiziológiai és morfológiai jellemzőik szerinti elkülönítésére használnak. Lehetnek intracelluláris vagy extracelluláris tulajdonságokkal. A DNS, az RNS és a fehérjék kölcsönhatását intracelluláris interaktív tulajdonságnak, míg az alakot, a méretet és a különböző felületi fehérjéket extracelluláris tulajdonságoknak tekintik. A modern tudományban a sejtválogatás módszerei segítettek a különböző biológiai vizsgálatokban, valamint az orvostudományi kutatásokon keresztül új elvek megállapításában. A sejtosztályozást különféle módszerekkel végzik, amelyek magukban foglalják a primitív, kevesebb felszereléssel és a fejlett technológiai módszereket, kifinomult gépek használatával. Az áramlási citometria, a fluoreszcens aktivált sejtválogatás (FACS), a mágneses sejtszelekció és az egysejt-válogatás a fő alkalmazott módszerek. Az áramlási citometriát és a FACS-t a sejtek optikai tulajdonságaik szerinti megkülönböztetésére fejlesztették ki. A FACS az áramlási citometria speciális típusa. Az áramlási citometria egy olyan módszertan, amelyet heterogén sejtpopuláció analízise során alkalmaznak különböző sejtfelszíni molekulák, méret és térfogat szerint, amely lehetővé teszi egyedi sejtek vizsgálatát. A FACS egy olyan eljárás, amelynek során a sejtminta keverékét fényszórási és fluoreszcencia jellemzőik szerint két vagy több tartályba rendezik. Ez a legfontosabb különbség az áramlási citometria és a FACS között.
Mi az áramlási citometria?
Az áramlási citometria egy olyan módszer, amely az intracelluláris molekulák és a sejtfelszín expressziójának vizsgálatára és meghatározására, valamint különböző sejttípusok meghatározására és jellemzésére szolgál. A sejttérfogat és -méret meghatározására, valamint az izolált alpopulációk tisztaságának értékelésére is használják. Ez lehetővé teszi az egyes cellák többparaméteres kiértékelését körülbelül egy időben. Az áramlási citometriát a fluoreszcensen jelölt antitestek által termelt fluoreszcencia intenzitásának mérésére használják, amelyek segítenek azonosítani a kapcsolódó sejtekhez kötődő fehérjéket vagy ligandumokat.
01. ábra: Áramlási citometria
Az áramlási citometria általában három alrendszert foglal magában. Ezek a folyadékok, az elektronika és az optika. Az áramlási citometriában öt fő komponens áll rendelkezésre, amelyeket a sejtválogatásban használnak. Ezek egy áramlási cella (folyadékáram, amelyet szállításukra és a cellák optikai érzékelési folyamathoz való igazítására használnak), mérőrendszer (különböző rendszerűek lehetnek, beleértve a higany- és xenonlámpákat, nagy teljesítményű vízhűtéses vagy kis teljesítményű léghűtéses lézerek vagy diódalézerek), egy ADC; Analóg-digitális konverter rendszer, erősítő rendszer és számítógép az elemzéshez. Az adatgyűjtés az a folyamat, amelynek során áramlási citométerrel gyűjtik az adatokat a mintákból. Ezt a folyamatot egy számítógép közvetíti, amely az áramlási citométerrel van összekötve. A számítógépben található szoftver elemzi az áramlási citométerről a számítógépbe betáplált információkat. A szoftver az áramlási citométert vezérlő kísérlet paramétereinek beállítására is képes.
Mi az a FACS?
Az áramlási citometriával összefüggésben a fluoreszcenciával aktivált sejtválogatás (FACS) egy olyan módszer, amelyet biológiai sejtek keverékéből vett minták megkülönböztetésére és válogatására használnak. A sejteket két vagy több tartályból választják el. A szortírozási módszer a sejt fizikai tulajdonságain alapul, amely magában foglalja a sejt fényszórási és fluoreszcencia jellemzőit. Ez egy fontos tudományos technika, amellyel megbízható kvantitatív és minőségi eredményeket kaphatunk az egyes sejtekből kibocsátott fluoreszcens jelekről. A FACS során kezdetben az előre beszerzett sejtkeverék; egy szuszpenziót irányítanak egy keskeny folyadékáram közepére, amely gyorsan áramlik. A folyadék áramlását úgy tervezték meg, hogy a szuszpenzióban lévő sejteket az egyes cellák átmérője alapján szétválasszák. A szuszpenzió áramára vibrációs mechanizmust alkalmaznak, ami egyedi cseppek képződését eredményezi.
02. ábra: FACS
A rendszer úgy van kalibrálva, hogy egyetlen cseppet hozzon létre egy cellával. Közvetlenül a cseppek képződése előtt az áramlási szuszpenzió egy fluoreszcencia mérőkészüléken mozog, amely az egyes sejtekre jellemző fluoreszcenciát érzékeli. A cseppek képződésének helyén elektromos töltőgyűrűt helyeznek el, amely a fluoreszcencia intenzitásának mérése előtt töltést indukál a gyűrűben. Amint a cseppek kialakulnak a szuszpenziós áramból, a cseppekben egy töltés záródik, amely ezután egy elektrosztatikus eltérítő rendszerbe kerül. A töltésnek megfelelően a rendszer a cseppeket különböző tartályokba tereli. A töltés alkalmazásának módja a FACS-ban használt különböző rendszerektől függően változik. A FACS-ben használt berendezés fluoreszcenciával aktivált sejtválogatóként ismert.
Mi a hasonlóság az áramlási citometria és a FACS között?
Az áramlási citometriát és a FACS-t a sejtek optikai tulajdonságaik szerinti megkülönböztetésére fejlesztették ki
Mi a különbség az áramlási citometria és a FACS között?
Áramlási citometria vs FACS |
|
| Az áramlási citometria egy olyan módszer, amelyet heterogén sejtpopuláció különböző sejtfelszíni molekulák, méret és térfogat szerinti elemzése során használnak, és amely lehetővé teszi az egyes sejtek vizsgálatát. | A FACS egy olyan eljárás, amelynek során a sejtminta keverékét fényszórási és fluoreszcencia jellemzőik szerint két vagy több tartályba rendezik. |
Összefoglaló – Áramlási citometria vs FACS
A sejt minden élő szervezet alapvető szerkezeti és funkcionális egysége. A sejtválogatás az a folyamat, amelynek során a sejteket izolálják és különböző kategóriákba differenciálják intracelluláris és extracelluláris tulajdonságaik alapján. Az áramlási citometria és a FACS két fontos módszer a sejtválogatásban. Mindkét eljárást a sejtek optikai tulajdonságaik szerinti megkülönböztetésére fejlesztették ki. Az áramlási citometria egy olyan módszertan, amelyet heterogén sejtpopuláció analízise során alkalmaznak különböző sejtfelszíni molekulák, méret és térfogat szerint, amely lehetővé teszi egyedi sejtek vizsgálatát. A FACS egy olyan eljárás, amelynek során a sejtminta keverékét fényszórási és fluoreszcencia jellemzőik szerint két vagy több tartályba rendezik. Ez a különbség az áramlási citometria és a FACS között.
A Flow Cytometry vs FACS PDF verziójának letöltése
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet jegyzetének megfelelően. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen. Különbség az áramlási citometria és a FACS között
