A fő különbség a génamplifikáció és a génklónozás között az, hogy a génamplifikáció az a folyamat, amelynek során polimeráz láncreakcióval in vitro sok másolatot készítenek a számunkra érdekes génről. A génklónozás azonban egy olyan folyamat, amelynek során az érdeklődésre számot tartó génről számos másolatot készítenek in vivo egy rekombináns plazmid előállításával és gazdabaktériummá történő transzformációjával.
A gén a DNS egy specifikus fragmentuma, amely egy fehérjét kódol. Egy szervezet több ezer gént tartalmaz. Ezenkívül lehetséges a fontos gének DNS-szekvenciáinak megsokszorozása molekuláris biológiai technikák segítségével. A génamplifikáció és a génklónozás két ilyen eljárás. Mindkét eljárás egy érdekes gén sok másolatát állítja elő. Van azonban különbség a génamplifikáció és a génklónozás között a módszertanukat tekintve.
Mi az a génamplifikáció?
A génamplifikáció az a folyamat, amikor egy adott génről polimeráz láncreakcióval másolatokat készítenek. Egy gén amplifikálásához az adott szervezet DNS-ét megfelelő DNS-kivonási protokoll segítségével kell kivonni. Ezután az extrahált kettős szálú DNS-t denaturálni kell, hogy különálló egyszálakat kapjunk. A következő lépésben PCR-reakciót alkalmazunk a kérdéses gén másolatainak elkészítéséhez. Ezenkívül a PCR keverék tartalmazza a szükséges primereket, nukleotidokat, DNS polimeráz enzimet, templát DNS-t és egyéb összetevőket. A PRC program végén megtörténik a kérdéses gén amplifikációja.
01. ábra: Génamplifikáció
Továbbá a génamplifikáció egy kezdeti lépés egy adott szekvencia kimutatásában, egy organizmus azonosításában, betegségek diagnosztizálásában és génkönyvtárak készítésében stb.
Mi az a génklónozás?
A génklónozás egy olyan géntechnológiai módszer, amellyel génkönyvtárakat vagy a kérdéses génről sok másolatot készítenek. Ez a folyamat magában foglalja egy rekombináns plazmid előállítását és a rekombináns plazmid gazdasejtté, különösen bakteriális sejtté történő transzformálását. A klón az eredeti szervezet vagy egy molekula azonos másolata. A génklónozás több ezer génklónt készíthet.
02. ábra: Gének klónozása
Miután a kérdéses gént azonosították, elválasztható egy adott organizmus genomjától úgy, hogy specifikus restrikciós enzimekkel korlátozzák. Ezután ugyanazt a restrikciós enzimet használva fel kell nyitni a plazmidokat (vektorokat) a génfragmens beillesztéséhez. Ezután a rekombináns plazmidot gazdabaktériummá transzformáljuk különböző módszerekkel, például elektroporációval. A rekombináns plazmidok egy része bejut a gazdabakteriális sejtekbe. Antibiotikum segítségével a transzformált baktériumok szelektálhatók, izolálhatók és friss tápközegben tenyészthetők. Így ez a technika több millió génklón beszerzését segíti elő.
Mi a hasonlóság a génamplifikáció és a génklónozás között?
- A génamplifikáció és a génklónozás két molekuláris biológiai technika.
- Mindkét technikában egy adott DNS-szekvencia vagy gén millió- vagy ezerszeresére szaporodik.
- Sőt, mindkét technika rendkívül fontos számos tudományos terület számára.
Mi a különbség a génamplifikáció és a génklónozás között?
A génamplifikáció egy olyan folyamat, amely egy adott génről másolatokat készít a PCR nevű in vitro módszerrel. Másrészt a génklónozás egy olyan folyamat, amely egy adott génről in vivo módszerrel másolatokat készít, rekombináns vektorok létrehozásával és élő szervezetben történő szaporításával. Tehát ez a legfontosabb különbség a génamplifikáció és a génklónozás között. Ezenkívül a génamplifikáció csak néhány órát vesz igénybe, míg a génklónozás több napig tart. Ezért ezt is a génamplifikáció és a génklónozás közötti különbségnek tekinthetjük. Ráadásul a génamplifikációs folyamat kevesebb hibát, míg a génklónozási folyamat több hibát mutat.
A következő infografika összefoglalja a génamplifikáció és a génklónozás közötti különbséget.
Összefoglaló – Génamplifikáció vs génklónozás
A génamplifikáció a kívánt gén másolatának elkészítésének folyamata polimeráz láncreakcióval in vitro körülmények között, míg a génklónozás egy érdekes gén másolatának készítése egy rekombináns DNS-molekula és egy élő szervezet/gazdaszervezet felhasználásával. baktérium. Tehát ez az alapvető különbség a génamplifikáció és a génklónozás között.
