A fő különbség a bradfordi és a Lowry-protein-teszt között az, hogy a Bradford-fehérje-vizsgálat a Coomassie briliánskék G-250 festék abszorbanciaeltolódásán, míg a Lowry-fehérje-teszt rézionok (Cu+)-ionok reakcióján alapul. peptidkötések Folin–Cioc alteu reagenssel történő oxidációjával keletkezik.
A vizsgálat egy analitikai módszer, amely segít a minta fő funkcionális összetevőinek jellemzésében. Ezért a vizsgálat lehet kvalitatív vagy kvantitatív teszt. Számos területen, beleértve a laboratóriumi orvoslást, a farmakológiát, a környezetbiológiát, a molekuláris biológiát, a biokémiát és az immunológiát, rutinszerűen alkalmazzák az ilyen típusú vizsgálatokat. A Bradford és Lowry fehérjevizsgálat két biokémiai vizsgálat, amelyek meghatározzák a fehérjekoncentrációt a mintaoldatban. Mindkét vizsgálat kolorimetriás technikát használ az eredmények eléréséhez.
Mi az a Bradford Protein Assay?
A Bradford protein assay egy gyors spektroszkópiai analitikai eljárás fehérjeanalízishez. Nagy pontosságot mutat az oldat fehérjekoncentrációjának mérésénél. Marion Bradford 1976-ban vezette be ezt az eljárást. Ebben a vizsgálatban a teljes reakció a mért fehérjék aminosav-összetételén alapul. Más szavakkal, a Bradford fehérjevizsgálat egy kolorimetriás vizsgálat. A Coomassie briliánskék festéket használja. Ezért ez a kolorimetriás fehérjevizsgálat a festék abszorbanciaeltolódásától függ. A Coomassie briliánskék G-250 három formátumban létezik: kationos (piros), anionos (kék) és semleges (zöld). Savas körülmények között a festék vörös formája kékké alakul. Megerősíti a fehérje kötődését. Ha a fehérje nincs jelen, az oldat barna színű maradhat.
01. ábra: Bradford fehérjevizsgálat
A bradfordi fehérjevizsgálat különbözik a többi fehérjeteszttől, mivel kevésbé érzékeny a fehérjeoldatban jelenlévő különféle kémiai vegyületek interferenciájára. Ezek a vegyületek közé tartozik a nátrium, kálium, glükóz és szacharóz stb.
Mi az a Lowry Protein Assay?
A Lowry protein assay egy biokémiai vizsgálat, amelyet az oldatban lévő teljes fehérjeszint meghatározására használnak. Oliver H. Lowry az a személy, aki 1940-ben kifejlesztette ezt a reagenst. Az eljárás az oldat teljes fehérjekoncentrációját az oldat fehérjekoncentrációjával arányos színváltozással ábrázolja. Ezért ez egy kolorimetriás fehérjevizsgálat is.
A peptidkötések oxidációja során keletkező rézionok (Cu+) és a Folin–Cioc alteu reagens közötti reakció az eljárás alapja. Ezenkívül ez a reagens foszfomolibdénsavat és foszfor-volfrámsavat is tartalmaz. A Lowry-fehérje-teszt reakciómechanizmusa azonban nem teljesen ismert. De ez magában foglalja a cisztein, triptofán és tirozin maradékok oxidációját a Folin–Cioc alteu reagens redukciójával.
02. ábra: Lowry fehérjevizsgálat
A cisztein-maradékok hozzájárulnak a Lowry-protein-tesztben megfigyelt abszorbanciához, és a reakció egy ragyogó kék molekulát eredményez; heteropoli molibdén kék. Ennek a molekulának a redukcióját a 660 nm-en mért abszorbanciával mérjük. Ennélfogva a Folin–Cioc alteu reagenst redukáló cisztein és triptofán koncentrációja levezeti a fehérje teljes koncentrációját az oldatban.
Mi a hasonlóság a Bradford és a Lowry Protein Assay között?
- Bradford és Lowry fehérjevizsgálatok határozzák meg az oldat fehérjekoncentrációját.
- Mindkét módszer kolorimetriás módszer.
- Ezenkívül mindkét módszer érzékenysége magas.
Mi a különbség a Bradford és a Lowry Protein Assay között?
A Bradford és a Lowry protein assay kétféle vizsgálati módszer, amelyek meghatározzák a fehérjekoncentrációt az oldatban. A Bradford fehérjevizsgálat a Coomassie briliánskék G-250 festék abszorbanciaeltolódásán, míg a Lowry fehérjevizsgálat a peptidkötések oxidációja során keletkező rézionok és Folin-Cioc alteu reagens reakcióján alapul. Tehát ez a legfontosabb különbség a Bradford és a Lowry fehérjevizsgálat között. A Bradford fehérjevizsgálat 15 percet vesz igénybe, míg a Lowery protein assay 40-60 percet vesz igénybe. Így ez egy másik különbség a Bradford és a Lowry fehérjevizsgálat között. Ezenkívül a Bradford-fehérje-teszt az aminosav-összetételtől, míg a Lowry-fehérje-vizsgálat részben az aminosav-összetételtől függ. Ezért ez is különbség a Bradford és a Lowry fehérjevizsgálat között.
Az alábbi infografika további részleteket tartalmaz a Bradford és a Lowry fehérjevizsgálat közötti különbségről.
Összefoglaló – Bradford vs Lowry Protein Assay
A vizsgálat egy analitikai technika, amelyet a minta fő funkcionális összetevőinek jellemzésére használnak. A Bradford és Lowry fehérjevizsgálat kétféle fehérjevizsgálat, amelyek kolorimetriás technikák mellett működnek. Mind a Bradford, mind a Lowry fehérjevizsgálat meghatározza az oldat fehérjekoncentrációját. A Bradford és a Lowry Protein Assay közötti fő különbség azonban az általuk használt kolorimetriás technikában rejlik. A Bradford fehérjevizsgálat a Coomassie briliánskék G-250-et, míg a Lowry fehérjevizsgálat rézionokat (Cu+) és Folin-Cioc alteu reagenst használ. Ezenkívül a Bradford-módszer gyorsabb eredményeket ad, mint a Lowry fehérjevizsgálat. Mindazonáltal mindkét módszer rendkívül érzékeny módszer, és különböző anyagok interferenciájának vannak kitéve.
