Fő különbség – Immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia
A molekuláris biológiai módszereket alkalmazó betegségdiagnosztika a klinikai laboratóriumi technológia feltörekvő területévé vált. Tartalmazza az összes olyan tesztet és módszert, amellyel egy szervezetben DNS, RNS vagy expresszált fehérjék elemzésével azonosítani lehet egy betegséget és megérteni a betegség okát. A molekuláris diagnosztika gyors fejlődése lehetővé tette a fertőző és nem fertőző betegségek alapkutatását. Ezeket arra használják, hogy meghatározzák a szekvencia vagy az expressziós szintek változásait a betegségben szerepet játszó döntő génekben vagy fehérjékben. Az immunfluoreszcencia (IF) és az immunhisztokémia (IHC) két ilyen széles körben alkalmazott technika a rákbiológiában. Az IF egyfajta IHC, ahol fluoreszcens kimutatási módszert alkalmaznak a monoklonális és poliklonális antitestek elemzésére, míg az IHC kémiai alapú módszereket használ a monoklonális és poliklonális antitestek kimutatására. Ez a legfontosabb különbség az IF és az IHC között.
Mi az immunfluoreszcencia (IF)?
Az immunfluoreszcencia olyan kimutatási technika, amelyben a vizsgálatban használt antitesteket fluoreszcens festékek vagy fluoreszcens fehérjék segítségével jelölik ki kimutatás céljából. A jelölt másodlagos antitestek nem kívánt háttérjeleket eredményezhetnek; ezért az IF technika jelenleg magának az elsődleges antitestnek a jelölésén alapul, hogy elkerülje a nem kívánt jeleket a detektálás során. Ezzel a technikával az elsődleges és a másodlagos antitest közötti nem specifikus kötődés megakadályozható, és gyorsabb, mivel nincs másodlagos inkubációs lépés. Az adatminőség is javult.
01. ábra: Kettős immunfluoreszcens festés BrdU, NeuN és GFAP esetén
A fluorokrómok vagy fluoreszcens festékek olyan vegyületek, amelyek elnyelik a sugárzást, lehetőleg a gerjesztett ultraibolya sugárzást. Amikor a részecskék a gerjesztett állapotból elérik az alapállapotot, sugárzást bocsátanak ki, amelyet egy detektor felfog és detektál, így spektrumot alkot. Nagyon fontos, hogy a fluoreszcens jelölés kompatibilis és stabil legyen az adott reakcióhoz, és megfelelően konjugálva legyen az antitesthez a pontos eredmények elérése érdekében. Az egyik leggyakrabban használt fluorokróm a fluoreszcein-izotiocianát (FITC), amely zöld színű, abszorpciós és emissziós csúcshullámhossza 490 nm, illetve 520 nm. A rodamin, egy másik, az IF-ben használt szer, vörös színű, és abszorpciós és emissziós csúcs hullámhossza 553 nm és 627 nm.
Mi az immunhisztokémia (IHC)?
Az IHC egy molekuláris vizsgálati módszer, amelyet az antigén célsejtben való jelenlétének azonosítására és megerősítésére alkalmaznak. A célsejt lehet fertőző részecske, mikrobiális kórokozó vagy rosszindulatú daganatsejt. Az IHC monoklonális és poliklonális antitesteket használ a célsejtek sejtfelszínén jelenlévő antigének jelenlétének meghatározására. A technika az antigén-antitest kötődésen alapul. Ezekhez az antitestekhez egy kimutatási markert konjugálnak az adott antigén jelenlétének vagy hiányának kimutatására. Ezek a markerek lehetnek kémiai markerek, például enzimek, fluoreszcensen jelölt antitestek vagy radioaktívan jelölt antitestek.
02. ábra: Immunhisztokémiával megfestett egér-agy szelet
Az IHC legnépszerűbb alkalmazása a rákos sejtbiológiában a rosszindulatú daganatok jelenlétének azonosítására, de fertőző betegségek kimutatására is használják.
Mi a hasonlóság az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között?
- Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia in vitro körülmények között történik.
- Mindkét technika az antigén-antitesten alapul
- Mindkettő nagyon gyors technika.
- A technikák eredményei reprodukálhatók.
- Mindkettő jobb adatminőséggel rendelkezik.
- Ezek a rák és fertőző betegségek diagnosztikájában használt technikák.
Mi a különbség az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között?
Immunfluoreszcencia kontra immunhisztokémia |
|
| Az IF olyan kimutatási technika, amelyben a vizsgálatban használt antitesteket fluoreszcens festékekkel vagy fluoreszcens fehérjékkel jelölik a kimutatáshoz. | Az IHC olyan kimutatási technika, amelyben a vizsgálatban használt antitesteket vegyi anyagok vagy radioaktív elemek segítségével jelölik ki a kimutatás céljából. |
| Pontosság | |
| A pontosság nagyobb az IF technikában az IHC-hez képest. | Az IHC pontossága alacsonyabb. |
| Sajátosság | |
| IF pontosabb. | IHC kevésbé specifikus. |
Összefoglaló – Immunfluoreszcencia kontra immunhisztokémia
A molekuláris mechanizmusok számos változást hoztak az orvostudomány területén, és olyan fejlett molekuláris vizsgálati módszereket eredményeztek, amelyek forradalmat idéztek elő a diagnosztika területén. Ezek a találmányok a betegség gyors és pontos azonosítását és megerősítését eredményezték, lehetővé téve ezáltal a gyógyszerek sikeres alkalmazását és előállítását. Ezeket a technikákat a farmakológiában is alkalmazzák, hogy megtalálják a gyógyszerek célpontját, és megerősítsék a gyógyszer farmakokinetikai tulajdonságait a gyógyszeranyagcsere során. Az IF és az IHC két diagnosztikai módszer, amelyek az antigén- és antitestkötés koncepcióján alapulnak, bár a kimutatás módja mindkét technikában eltérő. Az IF a fluoreszcencia elvét használja az antigén kimutatására, az IHC pedig a kémiai konjugáció fogalmát használja az antigén kimutatására. Ez a különbség az IF és az IHC között.
Az immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia PDF verziójának letöltése
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet jegyzetének megfelelően. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen: Különbség az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között.
