Fő különbség – Immuncitokémia vs immunhisztokémia
Az immuncitokémia (ICC) és az immunhisztokémia (IHC) a molekuláris diagnosztikában két széles körben használt technika, amely a sejteken található molekuláris markerek alapján azonosítja és megerősíti mind a nem fertőző, mind a fertőző betegségek előfordulását. Az immuncitokémia és az immunhisztokémia közötti kulcsfontosságú különbség az a molekula, amelyet ezekben a technikákban elemzési eljárásként használnak. Az ICC-ben primer és másodlagos antitesteket használnak markerekkel, például fluoreszcenciával, míg IHC, monoklonális és poliklonális antitesteket a diagnosztikai meghatározásokhoz.
Mi az immuncitokémia (ICC)?
Az ICC markerekhez, például fluoreszcens markerekhez vagy enzimekhez kötött primer és másodlagos antitesteket használ, és hatékony kimutatási módszer a célsejteken jelenlévő antigének kimutatására, amelyek lehetnek fertőző sejtrészecskék vagy rákos daganatsejtek. Az immuncitokémiához háromféle kontroll szükséges.
- Primary Antibody – kontroll, amely az antigénhez kötődő elsődleges antitest specifitását mutatja
- Másodlagos antitest – kontroll, amely azt mutatja, hogy a címke specifikus az elsődleges antitestre
- Címkevezérlők – mutassa meg, hogy a címkézés a hozzáadott címke eredménye, nem pedig az endogén címkézés eredménye.
01. ábra: Az immuncitokémia egyes fehérjéket jelöl meg a sejtekben (itt a szimpatikus autonóm neuronok axonjaiban lévő tirozin-hidroxilázt zöld színnel jelöltük).
Az elsődleges antitest-kontroll minden új antitestre specifikus, és nem ismételhető meg minden kísérletnél. A másodlagos antitest kontrollt a kísérletben használt elsődleges antitest alapján tervezték meg, és minden kísérlethez mellékelték. A címkézési vezérlőt akkor tartalmazza, ha az eljárás valamely feltétele megváltozik, a minta megváltozik, vagy ha váratlan címkézést találunk.
Az ICC két fő alkalmazása a Radio Immuno – Assay (RIA) és az Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). A leggyakrabban használt antitest a G immunglobulin.
Mi az immunhisztokémia (IHC)?
Az immunhisztokémiában a forrásminta monoklonális és poliklonális antitesteket tartalmaz annak érdekében, hogy meghatározzák az antigének jelenlétét az idegen sejtekben. Ez a technika az antigén-antitest kötődés specifikus reakcióján alapul. A kimutatáshoz használt antitestek különböző markerekkel jelölhetők; lehetnek fluoreszcens markerek, radioaktívan jelölt markerek vagy kémiai markerek. Az antigén és a megcélzott antitest közötti in vitro kötődés megkönnyítése révén meghatározható egy sejt adott fehérjéjének jelenléte vagy hiánya.
02. ábra: Normál vese immunhisztokémiai festése CD10-nel
Jelenleg a tudósok olyan sejtekben jelenlévő specifikus antigének célellenanyagainak kifejlesztésében vesznek részt, amelyek vagy rosszindulatú daganatsejtekként, vagy fertőző ágensekben, például HIV-ben jelen lévő antigénekként fejlődhetnek ki.
Mi a hasonlóság az immuncitokémia és az immunhisztokémia között?
- A reakciók nagyon specifikusak és pontosak az ICC-ben és az IHC-ben.
- Az ICC és az IHC alkalmazásai közé tartozik a rák- és fertőző betegségek diagnosztikája.
- Mindkét körülmény között steril körülményeket kell fenntartani, és ezeket in vitro kell végrehajtani
- Mindkét technika reprodukálható eredményeket biztosít.
- Mindkettő gyors.
- Rádiós címkézési, fluoreszcens technikákat használnak kimutatási módszerként mind az ICC-ben, mind az IHC-ben.
- Mindkettő antigén-antitest párosításon alapul.
Mi a különbség az immuncitokémia és az immunhisztokémia között?
Immuncitokémia (ICC) kontra immunhisztokémia (IHC) |
|
| Az ICC elsődleges és másodlagos antitestekhez kötött markereket, például fluoreszcens markereket vagy enzimeket használ, és hatékony kimutatási módszer a célsejteken jelenlévő antigének kimutatására. | Az IHC egy olyan módszer, amely monoklonális és poliklonális antitesteket használ az antigének jelenlétének meghatározására, amelyek a sejtfelszínen elhelyezett speciális fehérjemarkerek. |
| Mintaforrás | |
| Az ICC-ben olyan szövetekből származó mintákat használnak, amelyeket szövettanilag vékony metszetekre dolgoztak fel. | Az IHC olyan mintákat használ, amelyek egyrétegű sejtekből vagy szuszpenziós sejtekből állnak, amelyeket tárgylemezre helyeznek. |
| Mintafeldolgozás | |
| Az ICC-ben a sejteknek permeábilisnek kell lenniük, hogy megkönnyítsék az antitestek behatolását az intracelluláris célpontokba. | Az IHC-ben a sejteket formalinban rögzítik, és a festés előtt paraffinba ágyazzák. |
Összefoglaló – Immuncitokémia kontra immunhisztokémia
A molekuláris diagnosztikát a nem fertőző betegségek és a fertőző betegségek előfordulásának azonosítására és megerősítésére használják a sejteken található molekuláris markerek alapján. A molekuláris markerek lehetnek fehérjék vagy DNS- vagy RNS-szekvenciák; Az olyan technológiák fejlesztése, mint az ICC és az IHC, megnyitotta az utat a tudósok számára a betegség és annak okának korai szakaszában történő azonosítására. Mind az ICC, mind az IHC az antitest és az antigén közötti specifikus reakcióktól függ, bár a minta forrása. A fő különbség az immuncitokémia és az immunhisztokémia között a két eljárás mintafeldolgozása.
Az Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry PDF verziójának letöltése
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet jegyzetének megfelelően. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen: Különbség az immuncitokémia és az immunhisztokémia között.
