Fő különbség – In situ hibridizáció vs immunhisztokémia
A rák- és fertőző betegségek diagnosztikája népszerű irányzat, ahol új proteomikai és genomikán alapuló technikákat alkalmaznak a daganatok vagy fertőző sejtek azonosítására, szaporodására és a sejtfejlődés helyére, valamint a legtöbb fertőző és fertőző betegség genetikai alapjainak elemzésére. nem fertőző betegségek. Ez pontos gyógyszerfeldolgozást és -tervezést, valamint betegségekre testreszabott terápiák kidolgozását eredményezi. Az in situ hibridizáció (ISH) és az immunhisztokémia (IHC) két ilyen széles körben használt technika a rákbiológiában, és az in situ hibridizáció és az immunkémia közötti kulcsfontosságú különbség az elemzési eljárásban használt molekulákban rejlik. Az ISH-ban a nukleinsavpróbákat használják az elemzéshez, míg az IHC-ben monoklonális és poliklonális antitesteket használnak a diagnosztikai meghatározásokhoz.
Mi az In Situ hibridizáció (ISH)?
Az in situ hibridizáció egy nukleinsav-hibridizációs technika, amelyet közvetlenül a szövet egy részén vagy szakaszán, a teljes szövetben vagy sejtekben hajtanak végre. A technika a Watson Crick komplementer bázispárosítás elméletétől függ, ami vagy DNS-DNS hibrideket vagy DNS-RNS hibrideket eredményez, amelyek képesek kimutatni a mutált géneket vagy azonosítani a kívánt gént. Egyszálú DNS-szekvenciákat, kétszálú DNS-szekvenciákat, egyszálú RNS-szekvenciákat vagy szintetikus oligonukleotid-szekvenciákat használnak próbaként a hibridizációs technika során, és ezeket a próbákat radioaktív foszforral jelölik az 5' végén az autoradiográfiás azonosítási eljárásokhoz, vagy fluoreszcens festékekkel jelölik.. A használt szonda típusától és a követett vizualizációs technika típusától függően különböző típusú ISH-technikák állnak rendelkezésre.
01. ábra: Fluoreszkáló In Situ hibridizáció
Az ISH-nak számos alkalmazása van, főként a fertőző betegségek molekuláris diagnosztikájában a kórokozók jelenlétének azonosítása és a kórokozó molekuláris diagnosztikával történő megerősítése érdekében. A fejlődésbiológia, a kariotipizálás és a filogenetikai elemzés, valamint a kromoszómák fizikai térképezése területén is használják.
Mi az immunhisztokémia (IHC)?
Az IHC technikájában a fő elemzett molekula az antigén. Az IHC során monoklonális és poliklonális antitesteket használnak az antigének jelenlétének meghatározására fertőzés vagy rosszindulatú sejtproliferációs állapot esetén. A technika az antigén-antitest kötődésen alapul, és ehhez a technikához enzimjelöléseket használnak; az egyik ilyen alkalmazás az ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). A markerek lehetnek fluoreszcens címkével ellátott antitestek vagy radioaktívan jelölt antitestek is.
02. ábra: Immunhisztokémia
Az IHC-t széles körben használják rákos sejtek kimutatására. A diagnosztikai eljárások a tumorsejteken jelenlévő antigéneket célozzák meg a daganat azonosítása és jellemzése érdekében. Ugyanezt az eljárást alkalmazzák a fertőző ágensek diagnosztizálására. A monoklonális és poliklonális antitesteket különböző géntermékek elemzésére is használják, lehetővé téve az antitest-antigén kötési reakciót a kívánt fehérje és a beadott szintetikus antitest között.
Mi a hasonlóság az in situ hibridizáció és az immunhisztokémia között?
- ISH és IHC nagyon specifikus reakciók.
- Mindkét technika rendkívül pontos.
- Mindkét technika alkalmazható a rák és a fertőző betegségek diagnosztikájában.
- Ezeket a technikákat steril in vitro környezetben hajtják végre.
- Mindkettő gyors technika, amely reprodukálható eredményeket biztosít.
- Az ISH és az IHC olyan kimutatási módszereket használ, mint a rádiós jelölés és a fluoreszcens technikák.
Mi a különbség az in situ hibridizáció és az immunhisztokémia között?
In situ hibridizáció vs immunhisztokémia |
|
| Az ISH egy nukleinsav-hibridizációs technika, amelyet közvetlenül a szövet egy részén vagy szakaszán vagy a teljes szöveten hajtanak végre. | Az IHC egy olyan technika, ahol monoklonális és poliklonális antitesteket használnak az antigének jelenlétének meghatározására, amelyek a sejtfelszínen elhelyezett speciális fehérjemarkerek. |
| Az elemzett biomolekulák típusa | |
| ISH elemzi a nukleinsavakat. | Az IHC fehérjék-antigéneket elemzi. |
| A biokémiai reakció alapja | |
| Ebben a technikában komplementer bázispárosodás történik a DNS-DNS vagy a DNS-RNS között. | Az antigén-antitest kölcsönhatások szerepet játszanak az immunhisztokémiában. |
| Enzimhez kötött kimutatási módszerek | |
| Enzimhez kötött kimutatási módszerek nem használhatók az ISH-ban. | Enzimhez kötött kimutatási módszerek használhatók az IHC-ben. |
Összefoglaló – In situ hibridizáció vs immunhisztokémia
A molekuláris diagnosztika gyors és megerősítő módszerek, amelyek felhasználhatók nem fertőző betegségek, például rák vagy fertőző betegségek, például HIV vagy tuberkulózis azonosítására a sejteken jelen lévő molekuláris markerek alapján, amelyek a betegség megnyilvánulásához vezetnek.. A molekuláris markerek jelen lehetnek expresszált fehérjék formájában vagy genetikai szinten, amelyek alapján különböző új technikákat vezetnek be a hatékonyság növelésére és kevésbé fáradságosak, bár ezeknek a technikáknak a költségei magasak. Így az ISH a DNS-DNS vagy a DNS-RNS hibrid kialakulásától, az IHC pedig az antitest és az antigén közötti specifikus reakcióktól függ. Ez a különbség az in situ hibridizáció között.
Az In situ hibridizáció vs immunhisztokémia PDF verziójának letöltése
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet jegyzetének megfelelően. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen. Különbség az in situ hibridizáció és az immunhisztokémia között.
