Kulcskülönbség – CFU vs MPN
Kolóniaképző egység (CFU) és Legvalószínűbb szám (MPN) két módszer, amelyet a mikroorganizmusok számbavételére használnak a mintákban. Mindkét paraméter a vízminőség és a széklet indikátor baktériumok kimutatására szolgál a vízmintákban. A telepképző egység egy olyan mérték, amelyet az életképes baktériumsejtek vagy gombasejtek számának megszámlálására használnak egy adott minta fajlagos térfogatában vagy tömegében. Ennek a paraméternek a standard mértékegysége a CFU/ml vagy CFU/g. A legvalószínűbb szám egy másik mértékegység, amelyet a folyékony mintában lévő életképes baktériumsejtek számának mérésére használnak. A legfontosabb különbség a CFU és az MPN között az, hogy a CFU-t a szilárd agarlemezen növekvő baktérium- és gombatelepekből, míg az MPN-t a folyékony tápközegben növekvő életképes baktériumokból számítják ki.
Mi az a CFU?
Kolóniaképző egység (CFU) egy olyan paraméter, amely az életképes baktérium- vagy gombasejtek számát méri egy adott mintában. A telepképző egységeket számláló módszert standard lemezszámnak nevezzük. Az agarlemezeken megjelenő életképes telepeket a minta 1 ml-ére (kolóniaképző egység per milliliterre) számítva CFU-ként fejezzük ki folyadékok esetén, vagy CFU-ként a minta 1 g-jára (1 grammra vetített telepképző egységre) számítva szilárd anyagok esetén.
Két általános módszert használnak a CFU mérésére egy mintában. Ezek szétterített lemezes módszer és öntési lemez módszer. Ezt a két módszert a sorozatos hígításnak nevezett technika támogatja. A sorozatban hígított minták lehetővé teszik, hogy megszámlálható számú telepet nyerjünk az agar felületén. Ismert térfogatú mintát szórhatunk egy agarlemez felületére, vagy keverhetjük agarral és önthetjük egy lemezre. A lemezt ezután inkubáljuk, és megszámoljuk a keletkező telepeket. A telepek száma az eredeti mintában lévő mikroorganizmusok számától függ. A túl sok vagy túl kevés telepet mutató lemezeket kizárjuk a számlálásból, mert előfordulhat, hogy az eredmények statisztikailag nem pontosak ezeken a lemezeken. Statisztikailag a legjobb tartomány 30-300 telep egy agarlemezen. Ezért a pontos számbavételhez a megfelelő lemezeket kell kiválasztani. A fenti funkcióhoz sorozathígítás történik.
Ha megszámolja az életképes telepek számát a lemezeken, a CFU/ml a következő egyenlettel számítható ki.
CFU/ml eredeti minta=telepek száma a lemezen X hígítási tényező
Hígítási tényező=(1/ A lemez hígítása)
Ha például a 10-4 hígítás tányérján 149 telepet kapunk, akkor az eredeti minta 1 ml-ében lévő baktériumok számát a következőképpen számíthatjuk ki.:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 vagy 1490000
=1. 49 x 106
01. ábra: Kolóniaképző egység
Mi az MPN?
A legvalószínűbb szám a CFU/ml alternatív mértéke. Az MPN egy folyékony mintában is megbecsüli az életképes sejteket. Folyékony tenyészetben szaporodó organizmusokat számol, és túlnyomórészt bakteriológiai módszer. Ez a módszer különösen hasznos olyan minták esetében, amelyek alacsony koncentrációban tartalmaznak baktériumsejteket; például tej, ivóvíz stb. Az MPN értéket 100 ml térfogatra adják meg. Az MPN egy valószínűségszámításon alapuló statisztikai módszerre támaszkodik. Vannak statisztikai táblázatok, amelyek a minta 100 ml-ére vonatkoztatva megtalálják az MPN értékeket. Ezek a táblázatok az eredményeket 95%-os megbízhatósági határok mellett mutatják.
Az MPN érték kiszámítása a többcsöves fermentációs módszernek nevezett technika végrehajtása után történik. Három, megfelelő táptalajt tartalmazó csőkészletet oltunk be három különböző térfogatú mintával, például 10 ml-rel, 1 ml-rel és 0 ml-rel.1 ml-re, és a növekedéshez inkubáljuk. Az inkubációs periódus után a csöveket + (pozitív) vagy – (negatív) pontozzák a növekedés jelenlétére vagy hiányára. A pozitív és negatív eredmények mintázatát ezután összehasonlítják a statisztikai valószínűségeket tartalmazó MPN táblázattal, hogy megbecsüljék a mikroorganizmusok számát. Ezután az MPN értéket adjuk meg 100 ml mintára. Az MPN-t széles körben használják a vízmintákban jelenlévő coliform baktériumok kimutatására.
02. ábra: MPN táblázat
Mi a különbség a CFU és az MPN között?
CFU vs MPN |
|
| A CFU egy olyan mérték, amely az életképes baktérium- vagy gombatelepek számának kifejezésére szolgál egy adott mintában. | Az MPN a CFU alternatív mértéke, és az életképes baktériumsejtek számát méri egy folyékony mintában. |
| Egység | |
| CFU/ml vagy CFU/g | MPN/100 ml |
| Számítás | |
| A CFU kiszámítása az agarlemezeken nevelt telepek számának megszámlálásával történik. | Az MPN kiszámítása a csövek pozitív és negatív mintázatainak MPN statisztikai táblázattal való összehasonlításával történik. |
| Sorozatos hígítási technika | |
| A minták agarlemezekre helyezése előtt sorozathígítást kell végrehajtani. | A sorozatos hígítást általában nem hajtják végre az MPN kiszámításakor |
| Módszerek | |
| A terített lemezes módszer és a kiöntő lemez módszer kétféle módszer a CFU megszerzésére. | A többcsöves fermentáció az a módszer, amelyet az MPN érték megszerzésére végeznek. |
Összefoglaló – CFU vs MPN
A mikrobiális növekedés mérésére több okból is szükség van. Élelmiszer-feldolgozó üzemekben meg kell mérni az élelmiszerekben lévő mikroorganizmusok szintjét és típusát. Az élelmiszeriparban és az orvostudományban biztosítani kell a sterilizációs kezelések hatékony alkalmazását. A szennyvíztisztító telepeken rendszeres mikrobaszámlálást kell végezni. A molekuláris biológiában az eljárás optimalizálásakor meg kell mérni a telepek számát a lemezeken. Ezért különböző számbavételi és növekedésmérési módszerek állnak rendelkezésre. A CFU és az MPN két ilyen módszer, amelyet széles körben alkalmaznak különböző területeken. A CFU az adott mintában jelenlévő életképes baktérium- és gombatelepek számának mértéke. Kiszámítása szabványos lemezszámlálási módszerrel vagy életképes lemezszámlálási módszerrel történik. Az MPN egy másik mérőszám, amely a folyékony minta adott térfogatában jelen lévő baktériumsejtek számát fejezi ki. Többcsöves fermentációs módszerrel és MPN-táblázattal számítják ki. Ez a különbség a CFU és az MPN között.
A CFU vs MPN PDF verziójának letöltése
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet megjegyzései szerint. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen. Különbség a CFU és az MPN között.
