A legfontosabb különbség az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis között az, hogy az agaróz gélelektroforézis vízszintesen öntött agarózgéleket használ a viszonylag nagyobb DNS-fragmensek elválasztására, míg a poliakrilamid gélelektroforézis függőlegesen öntött poliakrilamid-gél-géleket használ a rövidebb nukleinsav fragmentumok elkülönítésére.
Az elektroforézis egy olyan technika, amely egy gélmátrixon keresztül alkalmazott elektromos mezőt használ biomolekulák, például DNS, RNS és fehérjék elválasztására. A biomolekulák, például DNS, RNS és fehérjék elektroforézissel történő szétválasztása a töltésen és a méreten alapul. A mintákat a gél üregeibe töltjük. Később az elektromos mezőt a gélen keresztül alkalmazzák. A mező hatására a negatív töltésű molekulák a pozitív elektróda felé mozognak. A gélmátrix molekuláris szitaként működik, amelyen a legkisebb molekulák gyorsan, míg a nagyobb molekulák lassan haladnak át vagy haladnak át. Ez lehetővé teszi a molekulák szétválasztását töltés és méret alapján. Ezért az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis kétféle gélelektroforézis technika, amelyek elsősorban a molekulák méretük és töltésük alapján történő elválasztását segítik elő.
Mi az agaróz gél elektroforézis?
Az agaróz gél elektroforézis egy olyan technika, amely agaróz géleket használ a biomolekulák, például a DNS és az RNS elkülönítésére. Ez egy olyan technika, amelyet a nukleinsavak elsősorban méret szerinti szétválasztására használnak. Az ebben a technikában használt fő agaróz nevű vegyület egy poliszacharid. Hínárból származik. Az agaróz feloldható forrásban lévő pufferben, majd vízszintesen tartott tálcába önthető. A tálcában lehűlve megszilárdul és lapot képez. Az agarózgéleket fésűvel a helyükre öntik, hogy lyukakat készítsenek, amelyekbe nukleinsavakat, például DNS-t vagy RNS-t töltenek, miután a gél megszilárdult.
01. ábra: Agaróz gél elektroforézis
A gélt később megfelelő pufferbe merítik, és áramot vezetnek át a gélen. A DNS-nek egységes negatív töltése van, amely független a molekula szekvencia-összetételétől. Ezért a DNS-molekulák a katódról (-) az anód (+) felé vándorolnak. A migráció sebessége közvetlenül függ a molekula méretétől. A legnagyobb makromolekulák számára a legnehezebb a gélen való navigálás. Másrészt a kisebb makromolekulák gyorsan és meglehetősen könnyen átcsúsznak a gélen.
Mi az a poliakrilamid gélelektroforézis?
A poliakrilamid gélelektroforézis (PAGE) egy olyan technika, amely poliakrilamid géleket használ a biomolekulák elkülönítésére. Ez egy olyan technika, amelyet széles körben alkalmaznak biológiai makromolekulák, általában fehérjék és nukleinsavak elválasztására elektroforetikus mobilitásuk szerint. Az akrilnitril hidratálása a nitril-hidratáz hatására akrilamidmolekulák képződéséhez vezet. Az akrilamid vízben oldódik, és szabad gyökös iniciátorok hozzáadásával az akrilamid polimerizálódik, aminek eredményeként poliakrilamid gél képződik. Normális esetben az akrilamid megnövekedett koncentrációja csökkenti a pórusméretet a gélben. A poliakrilamid géleket függőlegesen öntik, ellentétben az agaróz gélekkel.
02. ábra: Poliakrilamid gélelektroforézis
A poliakrilamid gélelektroforézis során a molekulák natív állapotukban futhatnak, megőrizve a molekulák magasabb rendű szerkezetét. Ezt a módszert natív PAGE-nak nevezik. Alternatív megoldásként kémiai denaturálószert is hozzáadhatunk a magasabb rendű szerkezet eltávolításához, és a molekulát strukturálatlan molekulává alakítjuk, amelynek mobilitása csak a hosszától függ. Ezt a típust SDS-PAGE-nak hívják.
Mi a hasonlóság az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis között?
- Az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis kétféle gélelektroforézis technika.
- Valójában ezek molekuláris biológiai technikák.
- Mindkét technikát használják biológiai makromolekulák, például DNS és fehérjék kimutatására.
- Ezeket a technikákat képzett technikusok vagy kutatók végzik.
- Mindkét technikánál a makromolekulák szétválasztása a töltésen és a méreten alapul.
- Mindkét technika lehetővé teszi a nukleinsavak, például a DNS és az RNS elválasztását.
Mi a különbség az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis között?
Az agaróz gél elektroforézis egy olyan technika, amely vízszintesen öntött agaróz géleket használ a biomolekulák elválasztására, míg a poliakrilamid gélelektroforézis egy olyan technika, amely függőlegesen öntött poliakrilamid géleket használ a biomolekulák elválasztására. Ez a legfontosabb különbség az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis között. Ezenkívül az agaróz gélelektroforézist a DNS és az RNS elválasztására, míg a poliakrilamid gélelektroforézist a nukleinsavak, például DNS, RNS vagy fehérjék elválasztására használják.
A következő táblázat összefoglalja az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis közötti különbséget.
Összefoglaló – Agaróz vs poliakrilamid gél elektroforézis
Az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis kétféle gélelektroforézis technika, amelyet a molekuláris biológiai laboratóriumokban használnak. Az agaróz gél elektroforézis agaróz gélt használ a biomolekulák elválasztására. Az agaróz általában nem mérgező az emberre, míg a poliakrilamid mérgező az emberre. Ezenkívül az agaróz gélelektroforézis alacsony, míg a poliakrilamid gélelektroforézis nagyobb felbontást mutat. A poliakrilamid gélelektroforézis poliakrilamid gélt használ a biomolekulák elválasztására. Ez összefoglalja az agaróz és a poliakrilamid gélelektroforézis közötti különbséget
