A legfontosabb különbség a HPLC és az UPLC között az, hogy a HPLC lehetővé teszi az 5 mikrométer körüli részecskék elemzését, míg az UPLC sokkal kisebb, 2 mikrométer körüli részecskéket tesz lehetővé.
A HPLC és az UPLC is folyadékkromatográfiás technikák, amelyek hasznosak egy vegyület komponenseinek elválasztásában. Ahhoz, hogy megismerjük a HPLC és az UPLC közötti különbséget, először tudnunk kell, mi az a HPLC. Ennek az az oka, hogy az UPLC a HPLC egy speciális változata, és könnyen megérthetjük, ha tudjuk, mi a HPLC.
Mi az a HPLC?
A HPLC kifejezés a nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát jelenti. Ez egy olyan technika, amellyel egy vegyület különböző összetevőit elválaszthatjuk. Ezenkívül ez a legszélesebb körben használt technika a keverék komponenseinek azonosítására, mennyiségi meghatározására és elkülönítésére. Ezenkívül ez a technika nagy nyomást használ az oldószerek átnyomására az oszlopon. Ezen túlmenően a HPLC fő alkalmazásai a biokémiában vannak a vegyület összetevőinek elemzésére. Ideális módja aminosavak, nukleinsavak, fehérjék, szénhidrogének, peszticidek, szénhidrátok, antibiotikumok, szteroidok és számtalan egyéb szervetlen anyag elkülönítésének és azonosításának.
01. ábra: HPLC rendszer a laboratóriumban
Röviden, a HPLC technika működési módja a következő. Először is, a mintát egy szivattyú segítségével kis mennyiségben, diszkrét mennyiségben kell bevezetni a mozgófázis áramába. A szivattyú nyomását 40 MPa értéken kell tartani. Ezután ez a mozgófázis-áram átszivárog a HPLC oszlopon. Ezenkívül a mintában lévő komponensek áthaladnak az oszlopon. A mozgási sebességük azonban különbözik egymástól. Ez a különbség a mintakomponensek és az oszlopon belüli adszorbens közötti kölcsönhatások különbségéből adódik. Ezt az adszorbenst állófázisnak nevezzük, mivel az oszlop belsejében található (nem mozog). Másodszor, az oszlop végén összegyűjthetjük az oszlopról eluálódó mintát. Itt meghatározhatjuk a retenciós idők közötti különbségeket a minta egyes komponenseinél.
Mi az UPLC?
Az UPLC kifejezés az ultranagy teljesítményű folyadékkromatográfiát jelenti. Ez a HPLC egy változata, de a működési mód ugyanaz. A HPLC-vel ellentétben azonban ez a módszer lehetővé teszi nagyon kis részecskék, például 2 mikrométeres kis részecskék elemzését.
02. ábra: UPLC-eszköz
Sőt, gyorsabb elemzést biztosít. Ennél a technikánál 100 MPa szivattyúnyomást alkalmazunk a minta oszlopba való behelyezésére. Ennélfogva ez a nagy nyomás megerősíti, hogy a teljes minta bekerül az oszlopba. Így ez nagyon hatékony a HPLC-hez képest.
Mi a különbség a HPLC és az UPLC között?
A HPLC kifejezés a nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát jelenti, míg az UPLC kifejezés az ultranagy teljesítményű folyadékkromatográfiát jelenti. Ezért az UPLC technika a HPLC továbbfejlesztett változata. Így a működési mód mindkét technika esetében azonos. Az UPLC azonban hatékonyabb a HPLC-hez képest, mivel nagy szivattyúnyomást használ; a szivattyú nyomása HPLC esetén 40 MPa, míg UPLC esetén 100 MPa. Ezért ez a különbség a HPLC és az UPLC között. Mindenekelőtt a HPLC és az UPLC közötti legfontosabb különbség az, hogy a HPLC lehetővé teszi az 5 mikrométer körüli részecskék elemzését, míg az UPLC sokkal kisebb, 2 mikrométer körüli részecskék elemzését teszi lehetővé.
Összefoglaló – HPLC vs UPLC
UPLC a HPLC egyik formája. Így a műveleti módszerek ugyanazok. Az UPLC-ben azonban találhatunk néhány jobb funkciót a HPLC-hez képest. Ezért van némi különbség a HPLC és az UPLC között. A HPLC és az UPLC közötti legfontosabb különbség azonban az, hogy a HPLC lehetővé teszi az 5 mikrométer körüli méretű részecskék elemzését, míg az UPLC sokkal kisebb, 2 mikrométer körüli részecskék elemzését teszi lehetővé.
