A legfontosabb különbség az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció között az, hogy az immunprecipitáció egy olyan technika, amely egy fehérjét csap ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével, míg a koimmunprecipitáció egy olyan technika, amely sértetlen fehérjekomplexeket csap ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével.
Az antigén-antitest kölcsönhatás egy specifikus kémiai kölcsönhatás a B-sejtek által termelt antitestek és az antigének (fehérjék) között az immunreakció során. Általában az oldható antigének oldható antitestekkel egyesülnek elektrolit jelenlétében oldható hőmérsékleten és pH-n, hogy oldhatatlan, látható komplexet képezzenek. Ezt nevezik kicsapódási reakciónak. Ezért az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció a kicsapási reakciók két típusa, amelyeket rutinszerűen alkalmaznak a laboratóriumokban fehérjék, például antigének azonosítására.
Mi az immunprecipitáció?
Az immunprecipitáció egy olyan technika, amellyel egy fehérjét kicsapnak az oldatból egy specifikus antitest segítségével. Néha ezt a technikát egyéni fehérje immunprecipitációnak is nevezik. Az immunprecipitáció egy antitestet használ, hogy izoláljon egy kiválasztott fehérjét a sejtlizátumból. Az antitest egy keverékből tisztítja meg specifikus célfehérjét vagy antigénjét. Az antitest a fehérjéhez kötődik, és az antitest-antigén komplexet kihúzzák a mintából. A kísérleti elrendezésben az antigén-antitest komplexet protein A/G-hez kapcsolt agaróz vagy mágneses gyöngyök segítségével húzzuk ki. Később a gyöngyöket mossuk, és a kívánt fehérjét eluáljuk. Az immunprecipitációval nyert tisztított fehérjét vagy antigént különféle technikákkal igazolják, például enzimhez kötött immunszorbens vizsgálattal (ELISA) és Western blot-val (WB).
01. ábra: Immunprecipitáció
Továbbá az izolált fehérjék vagy antigének tömegspektrometriával számszerűsíthetők és azonosíthatók az elsődleges szekvencián alapuló enzimatikus emésztési minták használatával. Vannak bizonyos szempontok az immunprecipitációs kísérlet megkezdése előtt: a módszer formátumának kiválasztása, a fehérjék és gyöngyök megkötése, a megfelelő elsődleges antitest és izotípus kiválasztása, valamint a negatív kontroll.
Mi az a koimmunprecipitáció?
A koimmunprecipitáció egy olyan technika, amellyel ép fehérjekomplexeket csapnak ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével. A koimmunprecipitáció általában egy specifikus antitest kiválasztásával működik, amely egy ismert fehérjét (antigént) céloz meg, amelyről úgy gondolják, hogy egy nagyobb fehérjekomplex tagja. Az ismert tag specifikus antitesttel történő megcélzásával lehetséges a teljes fehérjekomplex kihúzása az oldatból. Ez lehetővé teszi a komplexum ismeretlen tagjainak azonosítását. A fehérjekomplexek oldatból való kiemelésének koncepcióját néha „lehúzó” mechanizmusnak nevezik.
02. ábra: B Communoprecipitation
A koimmunprecipitáció egy hatékony technika, amelyet a fehérje-fehérje kölcsönhatások elemzésére használnak. A koimmunprecipitáció fő célja a kölcsönható partnerek, például ligandumok, kofaktorok vagy jelzőmolekulák azonosítása a kérdéses fehérjéhez. Ezenkívül a koimmunprecipitáció egy hatékony technika, amelyet a fehérjék szérumtól, sejtlizátumtól, homogenizált szövettől vagy kondicionált tápközegtől való elválasztására használnak.
Mi a hasonlóság az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció között?
- Az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció a kicsapási reakción alapuló technikák két típusa.
- Mindkét technika használható a célantigén azonosítására egy specifikus antitesten keresztül.
- Mindkét technika erősen függ az antigén-antitest kölcsönhatástól.
- Rutinszerűen használják a klinikai laboratóriumokban.
Mi a különbség az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció között?
Az immunprecipitáció egy olyan technika, amely egy fehérjét csap ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével, míg a koimmunprecipitáció egy olyan technika, amely sértetlen fehérjekomplexeket csap ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével. Így ez a legfontosabb különbség az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció között. Ezenkívül az immunprecipitációt gyakrabban alkalmazzák a laboratóriumokban, míg a koimmunprecipitációt nem általánosan használják laboratóriumokban.
Az alábbi infografika táblázatos formában mutatja be az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció közötti különbségeket egymás melletti összehasonlítás céljából.
Összefoglaló – Immunprecipitáció kontra koimmunprecipitáció
Az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció a kicsapási reakción alapuló technikák két típusa, amelyek az antigén-antitest kölcsönhatástól függenek. Az immunprecipitációs technika egy fehérjét csap ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével, míg a koimmunprecipitációs technika ép fehérjekomplexeket csap ki az oldatból egy specifikus antitest segítségével. Tehát ez összefoglalja az immunprecipitáció és a koimmunprecipitáció közötti különbséget.
