Kiemelt különbség – RNASE A vs RNASE H
A ribonukleázok olyan nukleázok, amelyek az RNS-t specifikusan kisebb egységekre bontják. Két kategóriába sorolhatók; endoribonukleázok és exoribonukleázok. Az endoribonukleáz egy olyan endonukleáz, amely képes lebontani az egyszálú vagy kétszálú RNS-t. Hasítja a foszfodiészter kötéseket egy RNS polinukleotid láncon belül. Példák az RNáz A, RNáz III, RNáz T1, RNáz P és RNáz H. Az exoribonukleáz egy olyan exonukleáz, amely az RNS-t az RNS-molekula 5'-végéről vagy 3'-végéről eltávolította terminális nukleotidok eltávolításával lebontja. A példák az RNáz R, az RNáz II, az RNáz D és az RNáz PH. A legfontosabb különbség az RNASE A és az RNASE H között az, hogy az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely specifikusan lebontja az egyszálú RNS-t kisebb komponensekre, míg az RNáz H egy nem specifikus enzim, amely az RNS-DNS hibridben lévő RNS-t kisebb egységekre hasítja. a hidrolitikus mechanizmus.
Mi az RNASE A?
Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely specifikusan hasítja az egyszálú RNS 3' végén lévő páratlan citozin és uracil maradékokat. Az RNáz H magasabb sókoncentrációban működik (0,3 M vagy magasabb NaCl koncentráció). A hidrolitikus reakció két lépésből áll. 3’ foszforilált terméket képez a 2’, 3’ ciklusos monofoszfát köztiterméken keresztül. Bár magasabb sókoncentráció esetén specifikus az egyszálú RNS-re, alacsonyabb NaCl-koncentrációnál (0,3 M NaCl-nél kisebb) is képes lebontani a kettős szálú RNS-t és az RNS-t RNS-DNS hibridben.
Bruce Merrifield először szintetizálta ezt az enzimet. Az RNáz A egy nagyon népszerű enzim a molekuláris kutatásban. A szarvasmarha-hasnyálmirigy RNáz A egy példa az RNáz A-ra. Ez az egyik legszívósabb enzim, amelyet a laboratóriumban használnak. Ennek az enzimnek nincs szüksége kofaktorra az aktivitásához. Ez egy nagyon hőstabil enzim. Az RNáz A az első enzim és a harmadik fehérje, amelynél a megfelelő aminosavszekvenciát kimutatták. Ez az enzim nagyon kicsi, 124 aminosavból áll, molekulatömege pedig 12600 da. És négy hisztidin-maradékot tartalmaz (His 12 és His 119, amelyek részt vesznek a katalitikus reakcióban).
01. ábra: Az RNáz A
Az RNáz A nyersminta forralásával izolálható. Forrásakor az összes többi enzim lebontja a megmaradt RNáz A-t. Az RNáz A elképesztően stabil enzim. Ez az enzim ribonukleáz inhibitor proteinnel, nehézfém- és uridin-vanadát komplexekkel gátolja.
Mi az RNase H?
Az RNáz H egy nem specifikus ribonukleáz enzim, amely hidrolitikus reakcióval képes lebontani az RNS-t az RNS-DNS hibridben. Az RNáz H elhasítja az RNS 3’- O-P kötését egy RNS-DNS hibridben. Végül 3’OH- és 5’-foszfátvégződésű termékeket állít elő. A DNS-replikációban kulcsszerepet játszik azáltal, hogy eltávolítja az RNS primert, miután új DNS-szálak képződnek. Laboratóriumi körülmények között specifikusan lebontja az RNS-t az RNS-DNS hibridben, de nem a DNS-t és a nem hibridizált RNS-t. És ezt az enzimet általában az RNS-templát megsemmisítésére használják, miután a cDNS-szintézis során létrejött az első komplementer DNS-szál.
02. ábra: RNáz H
Az RNáz H-t a nukleázvédelmi vizsgálatokban is használják. Beépíthető a poli-A farok eltávolításába is az mRNS-ből. Az RNáz H képes elpusztítani a nem kódoló RNS-t a sejten belül és kívül. A fémionok kofaktorként szükségesek ehhez a fehérjeaktivitáshoz. Egy kelátképző (EDTA) használható az RNáz H enzim gátlására.
Mi a hasonlóság az RNASE A és az RNASE H között?
- Mindkettő fehérjetermészetű.
- Mindkettő endoribonukleáz
- Mindkettő lebonthatja az RNS-t.
- Mindkettő hidrolitikus reakciót hajt végre.
- A molekuláris laboratóriumok mindkettőt használják.
Mi a különbség az RNASE A és az RNASE H között?
RNASE A vs RNASE H |
|
| Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely magasabb sókoncentrációnál specifikusan hasítja az egyszálú RNS párosítatlan citozin és uracil maradékainak 3' végét. | Az RNáz H egy nem specifikus ribonukleáz enzim, amely hidrolitikus reakcióval képes lebontani az RNS-t az RNS-DNS hibridben. |
| Az RNS-hasadás természete | |
| Az RNáz A specifikusan hasítja az egyszálú RNS-t magasabb sókoncentrációnál. | Az RNáz H hasítja az RNS-t az RNS-DNS hibridben. |
| Kotfaktorok szükségessége a tevékenységhez | |
| RNáz A tevékenységéhez nincs szüksége kofaktorokra. | Az RNáz H működéséhez fémionokra van szüksége kofaktorként. |
| A fehérjeaktivitás gátlói | |
| A ribonukleáz inhibitor fehérje, nehézfém és uridin-vanadát komplexek gátolják az RNS-áz A aktivitást. | A kelátképző (EDTA) gátolja az RNáz H aktivitását. |
| RNS primer eltávolítása DNS-replikációban | |
| Az RNáz A-t nem használják az RNS primer eltávolítására a DNS-replikáció során. | Az RNáz H-t az RNS primer eltávolítására használják a DNS-replikációban |
| DNS-sablon eltávolítása komplementer DNS (C-DNS) szintézisben | |
| Az RNáz A-t nem használják RNS-templát eltávolításra a komplementer DNS (C-DNS) szintézis során. | Az RNáz H az RNS-templát eltávolítására szolgál a komplementer DNS (C-DNS) szintézis során. |
| Poly-A-Tail eltávolítása oligová hibridizált mRNS-ből (dt) | |
| Az RNáz A-t nem használják a „poli-A farok” eltávolítására az oligóhoz (dt) hibridizált mRNS-ben. | Az RNáz H-t a „poli-A farok” eltávolítására használják az oligo-hoz hibridizált mRNS-ben (dt) |
Összefoglaló – RNASE A vs RNASE H
A ribonukleázok olyan nukleáz enzimek, amelyek képesek az RNS-t kisebb egységekre hasítani. Kétféle; endoribonukleázok és exoribonukleázok. Az endoribonukleáz egy olyan endonukleáz, amely képes lebontani az egyszálú vagy kétszálú RNS-t. És elhasítja a foszfodiészter kötést egy RNS polinukleotid láncon belül. Az RNáz A és az RNáz H két endoribonukleáz. Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely specifikusan hasítja az egyszálú RNS 3' végén lévő páratlan citozin és uracil maradékokat magasabb sókoncentráció mellett. Az RNáz H egy nem specifikus ribonukleáz enzim, amely hidrolitikus reakcióval képes lebontani az RNS-t az RNS-DNS hibridben. Ez a különbség az RNáz A és az RNáz H között.
Töltse le a PDF-fájlt: RNASE A vs RNASE H
Letöltheti ennek a cikknek a PDF-verzióját, és offline célokra használhatja az idézet jegyzetének megfelelően. Kérjük, töltse le a PDF verziót innen. Különbség az RNASE A és az RNASE H között
