Kulcskülönbség – RPMI vs DMEM
A legtöbb kutatás állati sejttenyésztéssel foglalkozik, ezért ezek a vizsgálatok az állati sejtvonalak különleges növekedési körülmények között történő fenntartását teszik szükségessé. Az állatsejttenyésztést széles körben végzik farmakológiai vizsgálatokban a gyógyszermetabolizmus azonosítására, a betegségdiagnosztikában és a rákkutatásban. A sejttenyésztő tápközeg az állati sejttenyésztés fontos eleme. A Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) és a Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) az állati sejttenyésztéshez használt két táptalaj. Az RPMI egy olyan táptalaj, amelyet széles körben használnak emlőssejtek szuszpenziós tenyészetben történő tenyésztésére. A DMEM egy módosított típusú alaptápközeg, amely akár négyszeresére növeli az aminosav- és vitaminkoncentrációt. A DMEM-et sejtek tapadó tenyészetekben történő tenyésztésére használják. A legfontosabb különbség a két média között a média kultúrájának típusa. Az RPMI-t szuszpenziós tenyészeteknél, míg a DMEM-et a tapadó sejtek tenyésztésére használják.
Mi az RPMI?
Az RPMI vagy Roswell Park Memorial Institute Medium RPMI 1640 néven is szerepel. A média nevét az az intézet származtatta, amelyben a médiát felfedezték. Ezt a tápközeget általánosan használják állati sejttenyészetekben, különösen emlőssejtek szaporodására. Eredetileg emberi limfociták szaporítására fejlesztették ki.
A következő összetevőket tartalmazza az RPMI.
- Glükóz
- pH-jelző (fenolvörös)\
- Sók (nátrium-klorid, nátrium-hidrogén-karbonát, dinátrium-foszfát, kálium-klorid, magnézium-szulfát és kalcium-nitrát)
- Aminósavak
- Vitaminok (i-inozitol, kolin-klorid, para-amino-benzoesav, folsav, nikotinamid, piridoxin-hidroklorid, tiamin-hidroklorid, kalcium-pantotenát, biotin és riboflavin, cianokobalamin)
Az RPMI különlegessége a megnövekedett foszfátkoncentráció a tápközegben. Az RPMI-t 5%-os szén-dioxid-atmoszférában használják. Ez biztosítja a sejtnövekedés maximális és optimális feltételeit. A tápközeg pH-ját a bikarbonát pufferrendszer 8,0 értéken tartja.
01. ábra: Sejttenyésztés Petri-csészén
Az RPMI alkalmazásai a sejtkultúrában
- Humán T- és B-limfociták, csontvelősejtek és hibridóma tenyésztése.
- Humán neoplasztikus sejtek tanulmányozására használták.
Mi az a DMEM?
A Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) egy módosított táptalaj, amelyet kereskedelemben állítanak elő. A közepes por eredeti textúrája sárga. A DMEM-ben a vitaminkoncentráció akár négyszeresére nő, ezáltal megnő a táptalaj tápanyagtartalma.
A DMEM-et további sók, például vas-nitrát, nátrium-piruvát és néhány nem esszenciális aminosav, például szerin és glicin hozzáadásával is módosították. A tápközegben lévő glükóz összetétele is megváltozik. Az eredeti készítmény 1000 mg/l glükózból áll, míg a DMEM-ben a koncentrációt 4500 mg/l-re növelik. A DMEM szérum táptalaj kiegészítését is igényli, mivel ez nem teljes táptalaj. Leggyakrabban a DMEM-et szarvasmarhamagzati szérummal (FBS) egészítik ki. Az FBS biztosítja a tenyésztési folyamathoz szükséges fehérjéket és növekedési faktorokat.
A tápközeg pH-ja nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadásakor változik. A tápközeg pH-ja nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadása előtt 6,80-7,40, míg a nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadása után a pH 7,60-8,20 tartományban van. A közeg tárolási hőmérséklete 2-8 0C.
02. ábra: DMEM
DMEM alkalmazásai
- A poliomavírus plakkképző képességének tanulmányozása egér embrionális sejtekben.
- Érintkezésgátlási vizsgálatokban.
- A csirke sejtkultúrák kutatásában és elemzésében.
Mi a hasonlóság az RPMI és a DMEM között?
- Az RPMI-t és a DMEM-et is használják állati sejttenyészetben.
- Mind az RPMI, mind a DMEM tápközeg folyékony készítmény.
- Mind az RPMI, mind a DMEM tápközeg tartalmazza a növekedéshez szükséges esszenciális aminosavakat, vitaminokat és szervetlen sókat.
- Az RPMI és a DMEM adathordozók sem teljesek. Ezért szérumot kell hozzáadni.
- Mind az RPMI, mind a DMEM média glükózt használ szénforrásként.
- Mind az RPMI, mind a DMEM tápközeg pH-ja magasabb.
Mi a különbség az RPMI és a DMEM között?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI egy olyan táptalaj, amelyet széles körben használnak emlőssejtek szuszpenziós tenyészetben történő tenyésztésére. | A DMEM egy módosított típusú bazális tápközeg, megnövelt aminosav- és vitaminkoncentrációval. |
| Extra foszfátok jelenléte | |
| Jelenleg az RPMI-ben. | Hiányzik a DMEM-ben. |
| Használja | |
|
Sejttenyésztésre használt tapadó tenyészetekben. Hozzászokott,
|
| A kultúra típusai | |
| Az RPMI-t szuszpenziós tenyészetekhez használják. | A DMEM-et sejttapadó tenyészetekhez használják. |
Összefoglaló – RPMI vs DMEM
Mind az RPMI-t, mind a DMEM-et széles körben használják állati sejttenyésztésben, különösen állati sejtvonalak, köztük limfociták in vitro tenyésztésére. A DMEM egy módosított alaptápközeg, ahol megnövekedett tápanyagkoncentráció van. Az RPMI-t a Roswell Park Memorial Institute fejlesztette ki, és egyben állati sejttenyésztéshez is használt táptalaj, különösen emlős limfociták számára. Mindkét adathordozó kereskedelmi forgalomban kapható. Ez a különbség az RPMI és a DMEM között.
