Kulcskülönbség – HPLC vs LCMS
Először nézzük meg a HPLC és az LCMS jelentését, mielőtt elemeznénk a HPLC és az LCMS közötti különbséget. A kromatográfia egy elválasztási technika a kémiai elemzésben, ahol a minta alkotórészeit a kromatográfiás közegen való áthaladás során választják el. Ez magában foglalja a mintával, az állófázissal és a mobil fázissal való interakciót is. A HPLC a High Performance Liquid Chromatography rövidítése, és folyadékkromatográfiás módszerként használják az analitikai kémiában. A folyadékkromatográfia és a tömegspektroszkópia (LCMS) kombinációját kiválasztott biomolekulák kvantitatív elemzésére fejlesztették ki, és a HPLC-hez képest rendkívül érzékeny, pontos és specifikus vizsgálati eljárás. Ez a legfontosabb különbség a HPLC és az LCMC között. Ez a cikk bemutatja a kémiai elemzéssel foglalkozó HPLC-t és LCMC-t, és megvitatja a HPLC és az LCMS közötti különbségeket.
Mi az a HPLC?
A nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) egy népszerű elválasztási technika az analitikai kémiában. Főleg a komponensek szétválasztására, a keverék egyes összetevőinek azonosítására és mennyiségi meghatározására szolgál. Korábban ezt a módszert nagynyomású folyadékkromatográfiának nevezték, mivel a szivattyúktól függött, hogy a mintakeveréket tartalmazó, nyomás alatt álló folyékony oldószert szilárd adszorbens anyaggal megtöltött oszlopon áramoltassa át. A mintakeverék minden egyes összetevője eltérően lép kölcsönhatásba a szilárd adszorbens anyaggal, ami különböző áramlási sebességeket eredményez a különböző összetevők esetében. Ez az összetevők szétválásához vezethet, amint kifolynak a HPLC oszlopból.
A HPLC-t különféle alkalmazásokhoz használták, mint például a vér D-vitamin szintjének elemzésére, a sportolók illegális kábítószer-használatára a vizeletben lévő gyógyszermaradványok kimutatásával, egy komplex biológiai minta összetevőinek kutatási és elemzési célú kiválogatására. és gyógyszergyártás.
Mi az LCMS?
A folyadékkromatográfia – tömegspektrometria (LCMS) egy olyan analitikai technika, amely egyesíti a folyadékkromatográfia fizikai elválasztási képességeit a tömegspektrometria (MS) tömegelemzési képességeivel. A folyadékkromatográfia egy elválasztási technika, és tömegspektrometriát használnak a töltött részecskék tömeg/töltés arányának elemzésére. A fizikai elválasztást általában HPLC-vel vagy LCMS-sel, más néven HPLC-MS-sel hajtják végre. Az LCMS egy domináns analitikai technika, amely a HPLC-hez képest nagyon nagy pontossággal, érzékenységgel és specificitással rendelkezik. Így számos alkalmazásban hasznos, például kutatási célokra, gyógyszeranalízisre, élelmiszer-elemzésre stb. Az LCMS-t főleg egy adott minta biokémiai tulajdonságainak elkülönítésére, kimutatására, azonosítására és mennyiségi meghatározására használják összetett kémiai keverékek jelenlétében.
Mi a különbség a HPLC és az LCMC között?
A HPLC és az LCMC rövidítése és meghatározása
HPLC: A HPLC a High-Performance Liquid Chromatography rövidítése. Ez egy elválasztási technika, amelyet főként a komponensek elválasztására, a keverék egyes összetevőinek azonosítására és mennyiségi meghatározására használnak.
LCMS: Az LCMS a folyadékkromatográfiát és a tömegspektrometriát jelenti. Ez egy analitikai technika, amely egyesíti a folyadékkromatográfia fizikai elválasztási képességeit a tömegspektrometria (MS) tömegelemzési képességeivel.
A HPLC és LCMC jellemzői
Osztályozás
HPLC: Ez csak egy folyadékkromatográfiás módszer.
LCMS: Ez a folyadékkromatográfiás módszer és a tömegspektrometriás módszer kombinációja.
Hatékonyság
HPLC: Az LCMS-hez képest a HPLC elemzés kevésbé hatékony és lassabb.
LCMS: A HPLC-hez képest az LCMS-elemzés hatékony és gyorsabb.
Érzékenység
HPLC: Az LCMS-hez képest a HPLC analízis kevésbé érzékeny.
LCMS: A HPLC-hez képest az LCMS analízis érzékenyebb.
Specifikusság
HPLC: Az LCMS-hez képest a HPLC elemzés kevésbé specifikus.
LCMS: A HPLC-hez képest az LCMS elemzés specifikusabb.
Pontosság
HPLC: A HPLC kevésbé pontos eredményeket ad egyes vegyi anyagok meghatározásához, mint az LCMS.
LCMS: Az LCMS pontosabb eredményeket ad, mint a HPLC bizonyos vegyi anyagok meghatározására.
Alkatrész
HPLC: A HPLC az LCMS komponensének tekinthető.
LCMS: Az LCMS nem tekinthető a HPLC összetevőjének.
Ionforrás
HPLC: Ionforrás nem létezik a HPLC készülékben.
LCMS: Ionforrás van jelen az LCMS készülékben.
Alkalmazások
HPLC: Az ionok, polimerek, szerves molekulák és biomolekulák HPLC-vel elemezhetők.
LCMS: Szerves molekulák és biomolekulák elemezhetők. A HPLC-vel ellentétben az LCMS használható a nem teljesen feloldott keverékek vizsgálatára.
Művelet
HPLC: A HPLC műszer diagramja az 1. ábrán látható, és általában tartalmaz egy automatikus mintavevőt, szivattyúkat és egy detektort. A mintavevő a mintakeveréket a mozgófázisba (oldószerek, például víz, acetonitril és/vagy metanol nyomás alatti keveréke) vezeti be, amely átviszi az oszlopra. A szivattyúk a mozgófázis kívánt áramlását és összetételét szállítják az oszlopon keresztül. Az oszlop meg van töltve az adszorbenssel, amely szemcsés szilárd részecske, például szilícium-dioxid vagy polimer. A detektor az oszlopban lévő mintaösszetevők mennyiségével arányos jelet állít elő, így lehetővé teszi a kiválasztott mintaösszetevők számszerűsíthető elemzését. A HPLC műszert digitális mikroprocesszor és felhasználói szoftver vezérli, az adatelemzést pedig digitális mikroprocesszor biztosítja.
1. ábra: A HPLC műszer diagramja
LCMS: Az LCMS készülék diagramja a 2. ábrán látható. A mintakivonatot behelyezzük a HPLC-t tartalmazó oszlopba. Ez az oszlop megtartja a minta metabolitjait a fizikai jellemzők alapján, és különböző metabolitok áramlanak a tömegspektrométerbe különböző időintervallumokban. A tömegspektroszkópia a részecskék tömegének meghatározására, a molekulák elemi elrendezésének meghatározására, valamint a molekulaszerkezetek tisztázására szolgál. A mintát azonban ionizálni kell, hogy töltött molekulákat hozzon létre, hogy meghatározhassuk azok tömeg/töltés arányát. Ezért a HPLC műszerek helyett az LCMS további három modulból áll, például vasforrásból, tömegelemzőből és detektorból. Egy ionforrás átalakíthatja a gázfázisú mintát ionokká, és egy tömegelemző, amely elektromágneses terek segítségével csoportosítja az ionokat tömegük szerint. Végül egy detektor számszerűsíti az értékeket, és adatokat szolgáltat a mintában lévő minden egyes ionról. Az LCMS technika minőségi és mennyiségi alkalmazásokhoz egyaránt használható.
2. ábra: LCMS-műszer diagramja
Összefoglalva, a HPLC egy folyadékkromatográfiás módszer, míg az LCMS a folyadékkromatográfia és a tömegspektrometria kombinációja. Mindkét elemzési technika eltérő tulajdonságokkal rendelkezik, de felhasználhatók élelmiszer-összetételek, gyógyszerek és más bioaktív molekulák azonosítására és mennyiségi meghatározására.
